《miR-135調控血管平滑肌細胞向成骨細胞分化的機制研究》是依託西安交通大學，由李輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-135調控血管平滑肌細胞向成骨細胞分化的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李輝
- 依託單位：西安交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
動脈鈣化是一種血管壁發生的類骨形成的主動調節過程，血管平滑肌細胞向成骨細胞表型分化是其重要病理基礎。我們前期研究發現miR-135在血管平滑肌細胞向成骨細胞分化過程中表達顯著降低，提示其參與調控動脈鈣化。本研究首先分離培養具有鈣化潛能的小鼠血管平滑肌細胞，通過調控miR-135水平來觀察miR-135表達改變對血管平滑肌細胞向成骨細胞分化的影響，闡明miR-135在此過程中的作用。隨後通過體內注射antagomirs特異性沉寂miR-135構建miR-135 缺失小鼠模型，動態觀察miR-135缺失狀態下血管平滑肌細胞表型變化及血管壁局部類骨形成過程。最後從多方面驗證miR-135作用的靶基因，揭示其作用機制。探討是否存在miR-135通過干擾血管平滑肌細胞向成骨細胞表型分化、抑制血管壁類骨形成，從而保護動脈鈣化的新機制，為其防治開闢新思路。
結題摘要
動脈鈣化是一種血管壁發生的類骨形成的主動調節過程，血管平滑肌細胞向成骨細胞表型分化是其重要病理基礎。我們前期研究發現miR-135在血管平滑肌細胞向成骨細胞分化過程中表達顯著降低，提示其參與調控動脈鈣化。本研究成功分離培養出具有鈣化潛能的小鼠血管平滑肌細胞。在誘導平滑肌細胞向成骨細胞分化的過程中，將miR-135過表達後，ALP活性和OC分泌水平顯著降低，而抑制miR-135表達後，二者表達顯著升高。提示miR-135可以抑制平滑肌細胞向成骨細胞的分化。隨後構建動脈硬化小鼠模型，通過體內注射antagomirs特異性沉寂miR-135的表達，結果顯示與骨形成相關的指標，如ALP、OC分泌水平及I型膠原水平等較對照組明顯升高。提示miR-135延緩或抑制動脈鈣化進程。最後，使用螢光素酶報告基因載體證實runx2為miR-135作用的靶基因，在誘導血管平滑肌細胞向成骨細胞分化過程中過表達miR-135，結果發現runx2蛋白水平明顯降低，而其mRNA水平無明顯變化，說明miR-135在轉錄後水平調控runx2表達，進而抑制血管平滑肌細胞向成骨細胞分化。本研究證實miR-135通過作調節runx2表達來干擾血管平滑肌細胞向成骨細胞表型分化、抑制血管壁類骨形成，從而保護動脈鈣化這一新機制，為其防治開闢了新的思路。
