《miR-2861對血管平滑肌細胞成骨分化的影響及機理研究》是依託中南大學，由謝輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-2861對血管平滑肌細胞成骨分化的影響及機理研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：謝輝
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
血管平滑肌細胞（VSMCs）成骨分化是血管鈣化的細胞學基礎。我們新克隆的一個具有促成骨作用的miR-2861高表達於鈣化的血管組織，提示其可能與血管鈣化相關。本課題採用鈣化型血管細胞（CVCs）和經β-甘油磷酸鈉誘導的VSMCs兩種細胞模型，觀察miR-2861對其成骨分化的影響，驗證miR-2861下調其靶基因HDAC5表達從而抑制Runx2蛋白降解的作用，並探討Runx2是否可以通過結合miR-2861啟動子區的互補序列（5′-ACCACA-3′）激活miR-2861轉錄。並注射antagomiR-2861建立miR-2861缺失小鼠模型觀察其在體內對血管鈣化的影響。本課題旨在探討是否存在miR-2861、HDAC5和Runx2組成自動調節正反饋環路促進血管平滑肌細胞成骨分化，從而發生血管鈣化的新機制，為其防治拓展新思路。
結題摘要
我們前期克隆了兩個成骨細胞特異性表達的miRNA分子miR-2861和miR-3960，它們在基因組中成簇存在，共同轉錄。miR-2861/miR-3960表達簇與轉錄因子Runx2形成成骨細胞分化的正反饋調控環路。此課題進一步研究它們對血管平滑肌細胞成骨分化的作用。MiR-2861或miR-3960過表達促進β-甘油磷酸鈉誘導的血管平滑肌細胞成骨分化過程中的ALP活性和OC分泌，並增加Runx2蛋白的表達。抑制MiR-2861或miR-3960的作用降低了血管平滑肌細胞成骨分化過程中的ALP活性及OC分泌，並抑制Runx2蛋白的表達。轉染miR-2861或miR-3960表達載體的血管平滑肌細胞HDAC5或Hoxa2蛋白水平下降，但HDAC5或Hoxa2 mRNA表達無明顯變化。轉染Runx2表達載體的血管平滑肌細胞中，miR-2861與miR-3960的表達增強。而轉染siRNA-Runx2的β-甘油磷酸鈉誘導的血管平滑肌細胞miR-2861與miR-3960的表達降低。注射antagomiR-2861 或antigomiR-3960減輕了活性維生素D誘導的小鼠動脈鈣化。綜上所述，MiR-3960/miR-2861/Runx2正反饋調控環路參與血管平滑肌細胞成骨分化，從而調控血管鈣化。調控血管平滑肌細胞中miR-2861/miR-3960/Runx2環路可能成為血管鈣化新的治療手段。
