《miR-101與其靶向circRNA相互調控機制及在膀胱癌中的作用研究》是依託華中科技大學，由曾甫清擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-101與其靶向circRNA相互調控機制及在膀胱癌中的作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：曾甫清
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
基因組絕大多數轉錄產物為非編碼RNA，闡明其作用已成為重要研究方向。本課題組前期研究證實：miR-101作用下調與膀胱癌進展密切相關，可作為研究膀胱癌發展機制及治療策略的重要靶點，其內在調控機理有待進一步闡明。最新研究揭示了非編碼RNA研究的全新領域：環狀RNA（circRNA）作為一類細胞內穩定高表達、具有組織特異性的新型非編碼RNA，可以以內源性競爭性RNA的形式抑制miRNA。生物信息學分析提示，RAN結合蛋白9編碼區轉錄過程中能夠產生兩種circRNA，均具有miR-101的結合位點，且表達具有膀胱癌特異性。我們初步研究亦表明，膀胱癌中這兩種circRNA表達均顯著升高，過表達靶向circRNA能夠進一步下調miR-101表達。本課題擬在此基礎上，系統解析膀胱癌中miR-101與其靶向circRNA相互調控機制，並構建膀胱癌細胞特異性核酸轉染體系，有望為膀胱癌的靶向治療提供新策略。
結題摘要
越來越多的證據表明環狀RNA（circRNAs）在調控基因表達中發揮著至關重要的作用。然而，circRNAs在膀胱腫瘤中的作用仍然不明確。在本研究中，我們發現miR-101相關的環狀RNA（BCRC4）在膀胱癌組織中的表達低於癌旁組織。過表達BCRC4可以促進膀胱癌細胞凋亡並抑制T24T和UMUC3細胞的增殖，並且上調BCRC4可以提高miR-101的表達水平，並能在RNA和蛋白質水平抑制組蛋白-賴氨酸N-甲基轉移酶（EZH2）的表達。藤黃酸（GA）作為膀胱癌治療的天然抗癌化合物，可以增加T24T和UMUC3細胞中的BCRC4的水平，並呈現濃度依賴性。此外，我們對膀胱癌組織及癌旁組織進行RNA高通量測序，鑑定了6,154種具有差異性表達的circRNA。總體上，我們發現共有524個circRNA在膀胱癌組織中明顯低表達，47個circRNA表達量升高。我們進一步發現，circHIPK3，又稱為膀胱癌相關環狀RNA-2（BCRC-2），在膀胱癌組織和細胞系中明顯低表達。它的表達與膀胱癌分級，侵襲以及淋巴結轉移呈負相關。過表達circHIPK3可在體外實驗中顯著抑制膀胱癌細胞的遷移侵襲和血管生成能力，並能在體內裸鼠實驗中抑制膀胱癌的生長和轉移。關於環狀RNA的作用機制，我們證明circHIPK3具有miR-558的兩個關鍵結合位點，並且可以大量吸附miR-558，導致乙醯肝素酶（HPSE）的表達明顯下調。最後，我們的研究結果證實了circRNA作為“microRNA分子海綿”的假設，提出了治療膀胱癌的新靶點。
