c-mip介導的信號傳導通路在足細胞損傷分子機制中的作用

《c-mip介導的信號傳導通路在足細胞損傷分子機制中的作用》是依託江蘇大學，由郁麗霞擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：c-mip介導的信號傳導通路在足細胞損傷分子機制中的作用
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：郁麗霞
• 依託單位：江蘇大學

項目摘要

蛋白尿是腎臟疾病的常見表現和獨立危險因素。近來研究證實腎小球足細胞分子表達異常參與了蛋白尿的發生髮展。Nephrin是第一個被發現的足細胞裂孔隔膜結構分子，而且其胞內酪氨酸位點磷酸化誘導的信號傳導在足細胞骨架重塑中起重要作用。C-mip是新近發現的另一個重要足細胞分子，我們前期在嘌呤黴素腎病大鼠中發現腎小球c-mip表達增加而nephrin磷酸化降低，在血管緊張素II足細胞損傷模型中發現c-mip可通過cbp和Fyn途徑下調nephrin的磷酸化繼而引起足細胞骨架變化和細胞凋亡。本課題擬在體內、外嘌呤黴素足細胞損傷模型，採用RNAi技術特異敲低c-mip表達，進而分析c-mip介導的信號通路在足細胞損傷以及蛋白尿發生髮展中的作用，以探索蛋白尿發生的新機制，也可為將來尋找新的高效而特異的蛋白尿治療靶點提供依據。

結題摘要

足細胞是構成腎小球濾過屏障基本功能的必要條件，研究證實足細胞分子表達異常參與了蛋白尿的發生髮展。 近年發現c-mip（c-maf-inducing protein）參與了先天性腎病綜征蛋白尿的發生。我們利⽤用si-cmip“敲低” c-mip的表 達,可顯著抑制嘌呤霉引起nephrin磷酸化水平的降低和細胞骨架的改變。 這提⽰c-mip在嘌呤黴素所致的⾜細胞損傷中起著關鍵作⽤。並發現抑制c-mip的表達可維持cofilin的正常活性,進⽽保持足細胞⾻架的穩定。在嘌呤黴素足細胞損傷模型中，我們發現敲除LIMK可抑制cofilin-1磷酸化的增加，使用Rho抑制劑 CT04可減少LIMK和cofilin-1磷酸化作用。這些數據顯示在足細胞損傷中通過RhoA活性以及LIMK磷酸化的增加介導了cofilin的磷酸化水平增加。通過敲低c-mip和轉染pcDNA- cmip質粒技術研究RhoA活性，結果提⽰嘌呤黴素誘導的c-mip過度產生可能通過抑制p190Rho GAP從⽽導致 RhoA活化。此外，在足細胞損傷中,通過上調SRC激酶的活性可以抑制Dip1 以及p190RhoGAP的活性降低,而敲低Dip1(si-Dip1)可以阻止p190RhoGAP活 性的增加。總之，我們發現提⽰cmip 表達(↑) - Fyn活性 (↓) - Dip1磷酸化 (↓) - p190RhoGAP磷酸 化 (↓) – RhoA活性 (↑) - LIMK 磷酸化(↑)-cofilin磷酸化⽔平增加⽽活性 (↓) 這⼀信號級聯通路參與了足細胞損傷引起的細胞骨架的改變。本研究不僅進一步拓寬和深入理解蛋白尿發生的分子機制，並為尋找新的蛋白尿治療靶點提供可能的理論依據。