《Nek6對血管損傷後內膜新生的影響及分子機制研究》是依託武漢大學，由王朗擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Nek6對血管損傷後內膜新生的影響及分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王朗
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Nek6是新近發現的一種能夠調節細胞周期，並對多種幾捆信號通路激酶和轉錄因子府祖騙牛有重要調控作用的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。目前國內外關於Nek6對血管內膜新生的作用及其機理的研究尚無相關報導。本項目前期的初步研究證實Nek6對血管損傷後內膜新生的發生髮展具有重要的影響。本項目擬從動物實驗和細胞實驗兩個方面進行研究。動物實驗部分，運用Nek6基因敲除小鼠，研究Nek6對血管損傷後血管新生內膜面積，細胞增殖 ，血管壁炎症的影響及分子機理。細胞試驗部分，分離培養Nek6基因敲除小鼠和野生型小鼠血管平滑肌細胞，培養大鼠血管平滑肌細胞通過重組腺病毒載體使Nek6過表達，運用分子生物學技術在細胞水平探討Nek6對平滑肌細胞增殖、遷移的作用及可能的分子機制。力圖明確Nek6在血管內膜新生中的作用及其對平滑肌細胞增殖、遷移作用的根本機制，為尋找內膜新生相關疾病的治療靶點提供新的理論依據。
結題摘要
本項目初始設計的內容為套用Nek6基因敲除小鼠研究Nek6對血管損傷後內膜增生的影響並探尋其分子機制。在第二年度的細胞雄良滲實驗部分，沒有得到與動物實驗相一致的表型。重複動物實驗後發現在較長(28d)時間點， Nek6基因敲除小鼠與野生型小鼠之間在內膜增生程度上未顯示出統計學差異。在排除了實驗方法以及實驗條件的偏差而導致的實驗結果的偏離後，課題組認為該項目無法繼續完成。由於項目負責人同期參與了缺血性腦血管病相關的基礎研究工作，並掌握了相關的細胞培養、分子生物學以及動物模型方面的實驗技術。項目負責人進行了一系列天然求重祝主免疫調節因子在缺血性腦卒中的作用及機制探討研究工作，其中重點開展了“Traf5對缺血性腦卒中的作用及機制探討”這一課題的研究。 缺血性腦卒中是腦卒中的主要類型，是危害人剃淋兵類健康的重大疾病之一，其治療手段十分有限。Trafs是TNF受體超家族以及IL-1R/TLR超家族的信號銜接蛋白，參與了包括天然免疫及獲得性免疫、腫瘤生成、胚胎髮育、應激反應等在內的多種生物體道台學功能的調控。Traf5是Traf家族成員之一，其參與了NF-kB和JNK信號通路的調控，並與某些病理狀態下神經膠質細胞的激活密切相關。但是既往無任何研究證明Traf5在缺血性腦卒中中的作用。本研究發現Traf5在缺血腦組織中的表達持續增高，提示其可能在腦缺血的病理生理過程中發揮了重要的調控作用。我們使用Traf5基因敲除和神經元特異性Traf5轉基因小鼠製備腦缺血模型，發現Traf5基因敲除有效的減少了梗死體積，凝承寒減輕了神經功能損傷，緩解了血腦屏障的破壞程度，減少了炎症因子的表達和炎症細胞的募集，而Traf5轉基因則顯示出了相反的作用。基質金屬蛋白酶MMP2和MMP9的表達和活性在Traf5基因敲除小鼠腦組織中被抑制而在Traf5轉基因小鼠中被激活。反應炎症激活水平的NF-kB信號通路在Traf5基因敲除小鼠中被抑制而在Traf5轉基因小鼠中被激活。進一步的研究發現，Traf5對腦缺血的調控作用是通過Akt/FoxO1信號通路實現的。本研究首次闡明了Traf5對腦缺血病理過程的調控作用，為缺血性腦卒中的治療提供了一個新的治療靶點。
