《MAF1基因在肝癌發生髮展中的作用機制及臨床套用研究》是依託中山大學，由張耀軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MAF1基因在肝癌發生髮展中的作用機制及臨床套用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張耀軍
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝癌位居我國惡性腫瘤死亡第二位，嚴重威脅國人健康，但其發生機制尚不清楚，治療手段有限，患者預後差。分子靶向藥物的發明給肝癌患者的治療帶來新的希望，找到新的肝癌相關分子靶點至關重要。目前發現mTOR信號通路的過度活化與腫瘤的發生、發展密切相關，是腫瘤治療的一個重要靶點。MAF1是mTOR信號通路中的重要調節蛋白。在前期的研究中，我們發現MAF1在肝癌組織中的表達顯著低於癌旁組織。在肝癌細胞株中過表達MAF1基因能抑制肝癌細胞生長。上述結果提示MAF1基因是一個潛在的抑癌基因。基於已有數據，本課題將致力於：（1）進一步證實MAF1在肝癌發生和進展中的作用；（2）揭示在肝癌中MAF1調控mTOR信號通路的分子機制；（3）探討MAF1基因在肝癌中在臨床上診斷及治療的意義。本項目的開展對深入了解mTOR信號通路在肝癌發病過程中的分子機制具有重要的意義，為提高分子靶向治療效果及研發新的靶向藥物提供新的思路。
結題摘要
在前期研究基礎上，我們首先構建了MAF1上調和下調的肝癌細胞株，觀察了MAF1對肝癌細胞的生長、轉移和侵襲以及對免疫缺陷小鼠成瘤性的影響，闡明了MAF1在肝癌中發揮著一個抑癌基因的作用；在機制研究中，我們發現過表達的MAF1抑制了HCC細胞的AKT-mTOR信號通路，而且在移植瘤的免疫組化測試中，也得到了相應的結果；在IGF-1、胰島素和血清誘導下，MAF1也能抑制生長激素導致的AKT和S6磷酸化水平；但是，Pol I和Pol III卻不能幹擾這些生長素誘導下AKT-mTOR信號，提示MAF1不是通過Pol I和Pol III來抑制AKT-mTOR信號。另一方面，MK2206和雷帕黴素只是一定程度抑制，並不能完全消除因MAF1敲降而增長的HCC增殖闡明了MAF1基因調控的下游靶基因及其參與的分子通路，揭示了MAF1基因對肝癌作用的分子機制；與此同時，把過表達和敲降的MAF1的肝癌細胞進行免疫印跡比較，發現過表達的MAF1引起PTEN的增長，其次，利用siRNA敲降PTEN， IGF-誘導下的AKT-mTOR 信號恢復了，並且HCC的增殖和侵襲也增長了；通過轉染PTEN螢光素酶質粒進入Hep3B, 利用螢光素酶的表達分析不同區域的PTEN啟動子的活性，發現MAF1能結合到PTEN -1344到-1001bp啟動子區，並證明了MAF1通過調節組蛋白乙醯化參從而調節PTEN的轉錄。綜上所述，MAF1通過激活PTEN的轉錄從而隔絕AKT-mTOR信號通路，進而抑制腫瘤細胞的增殖。在臨床樣本中，我們對146對B型肝炎病毒的陽性肝細胞癌和癌旁正常細胞進行免疫組化檢測，發現MAF1的表達程度與癌細胞病情發展相關，生存分析表明，MAF1低表達的患者生存率降低，這對肝癌的預後預測和以AKT-mTOR為靶向治療法有著重要的意義。我們按照研究計畫完成了所有內容，取得了豐碩成果，已發表二篇與MAF1直接相關的SCI論文，並在此基金的資助下，發表了另外9篇標註本基金號的SCI論文。
