《SMARCA4基因在肝細胞肝癌中的作用及其分子機制研究》是依託復旦大學，由莢德水擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：SMARCA4基因在肝細胞肝癌中的作用及其分子機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：莢德水
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝細胞肝癌（Hepatocelluar carcinoma，HCC）是世界上最常見的惡性腫瘤之一，對人類的健康和生存構成了極大的危害。在實驗室前期關於肝癌基因組拷貝數畸變相關研究過程中，發現了肝癌基因組中一個新的拷貝數擴增位點19p13.2，進一步研究發現這一擴增位點能夠特異性引起SMARCA4基因的表達水平上調，提示該基因作為一個潛在的腫瘤相關基因在肝癌發生、發展過程中發揮重要作用。本課題將著重對SMARCA4基因在肝癌中生物學功能及作用機理進行深入研究，為闡明肝癌發病分子機制及治療提供理論依據。首先，套用生物信息學及實驗方法確定SMARCA4基因在肝癌中的表達水平及其調控方式。然後，通過體內、外功能試驗結合高通量檢測技術確定SMARCA4基因在肝癌發生髮展過程中的生物學功能及分子機制。最後，通過免疫組織化學技術檢測SMARCA4在獨立大樣本量肝癌臨床組織標本中的蛋白並分析其臨床意義
結題摘要
肝細胞肝癌作為世界上最常見的惡性腫瘤之一，其引起的死亡占所有癌症相關死亡的第三位。然而關於這一致命癌症的病因和發病機制仍然不完全清楚。在實驗室前期工作中，通過高解析度SNP6.0晶片分析58例肝細胞癌原發灶與癌旁組織DNA，在肝癌基因組中共發現1241個拷貝數畸變位點。對其中一個新發現的拷貝數擴增位點19p13.2進行分析，發現此擴增位點包括SMARCA4基因，提示此基因可能在肝細胞癌中發揮重要作用。因此，本研究將重點對此基因在肝癌中的生物學功能和作用機制進行研究。首先，通過生物信息學以及定量PCR檢測技術，發現SMARCA4基因基因表達水平在肝癌原發灶中顯著上調。通過免疫組織化學技術，在獨立肝癌組織樣本中檢測SMARCA4蛋白表達水平，發現SMARCA4蛋白在肝細胞癌原發灶中水平顯著增加，並且能夠預測肝癌復發。通過體內外實驗，發現敲減SMARCA4基因能夠顯著抑制肝細胞癌細胞體內外增殖能力，能夠阻滯細胞周期於G1期，以及誘導細胞凋亡發生。另外，過表達SMARCA4基因能夠顯著促進肝細胞癌細胞的體外增殖能力，促進細胞周期從G1向S及G2期轉變，以及抑制細胞凋亡。通過ChIP-seq結合表達譜晶片分析，發現SMARCA4基因能夠特異性結合SMAD6基因啟動區，從而調控SMAD6基因的表達。進一步研究發現，SMAD6基因能夠促進肝細胞癌細胞的體外增殖，並且能夠介導SMARCA4基因的生物學功能。綜上所述，本研究發現SMARCA4基因作為一個在肝細胞癌中新發現的癌基因，其通過調控SMAD6基因而發揮其功能。
