ZNF32在肝癌發生髮展中的生物學功能和機制研究

《ZNF32在肝癌發生髮展中的生物學功能和機制研究》是依託四川大學，由李凱擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：ZNF32在肝癌發生髮展中的生物學功能和機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：李凱
• 依託單位：四川大學

項目摘要

原發性肝癌是臨床上常見的惡性腫瘤之一，嚴重危害人類健康。近年來研究發現癌基因和抑癌基因的表觀遺傳修飾異常，在肝癌的發生髮展過程中發揮了重要作用。我們前期通過SEREX技術篩選到肝癌相關抗原基因ZNF32，發現其在肝癌細胞和臨床肝癌組織中低表達，而甲基化抑制劑能促進肝癌細胞中ZNF32表達，並且過表達ZNF32能顯著抑制肝癌細胞增殖。本課題在前期工作基礎上，擬採用分子腫瘤學實驗方法研究ZNF32在肝癌發生髮展過程中的生物學功能及其受到表觀遺傳修飾的分子機制，明確ZNF32下游重要效應分子和關鍵調控網路，並結合臨床組織病理學分析闡明ZNF32在肝癌發生髮展中的病理學意義以及作為肝癌早期診斷標誌物或基因治療靶點的潛在套用價值。

結題摘要

鋅指蛋白ZNF32的功能尚不清楚，目前僅有我們項目組對其功能初步研究的報導。本項目著重闡明ZNF32在肝癌發生髮展過程中的生物學功能及調控機制。我們利用臨床肝癌樣本發現ZNF32在肝癌組織中的表達顯著低於癌旁正常肝組織，並且結合患者臨床病理信息分析發現ZNF32低表達的患者，其預後較差。我們證實轉錄因子SP1能夠直接結合在ZNF32啟動子（-1318/-1304和-43/-27bp）區域進而促進ZNF32轉錄。此外，在活性氧（ROS）誘導細胞凋亡模型中，高濃度ROS水平能夠抑制SP1的轉錄活性從而降低ZNF32的表達，導致線粒體損傷、細胞內脂質過氧化作用和抗氧化系統破壞增加，促進氧化應激誘導肝癌細胞發生凋亡；過表達ZNF32能夠顯著抵抗氧化應激對肝癌細胞的損傷。我們利用雙向電泳技術聯合生物質譜篩選到C1QBP可能是ZNF32潛在的下游基因，並通過螢光素酶報告基因、EMSA和ChIP等實驗證實ZNF32能夠直接結合在C1QBP啟動子（-1067/–1062bp）區域調控C1QBP轉錄。干擾C1QBP能夠顯著抑制過表達ZNF32降低細胞內ROS含量、維持線粒體膜電位、抵抗氧化應激誘導細胞凋亡的作用。本項目研究闡明了ROS/SP1/ZNF32/C1QBP信號軸在肝癌細胞生存、惡性發展過程中作用，建立了以ZNF32為中心的上下游調控網路，為肝癌的發生髮展提供了新的機制。本項目組完成了既定研究計畫，並在原計畫基礎上擴展研究了“ZNF32通過抑制自噬抵抗氧化應激誘導的細胞凋亡”以及“DDX17在非小細胞肺癌細胞耐藥中的功能及機制”的研究。本項目研究成果發表SCI論著3篇；協助培養在讀博士研究生2名，畢業博士研究生2名、畢業碩士研究生1名。