《分泌型Syntenin/MDA9在膠質瘤中的生物學功能和臨床套用研究》是依託蘇州大學，由李明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：分泌型Syntenin/MDA9在膠質瘤中的生物學功能和臨床套用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李明
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Syntenin（又稱MDA9）是廣泛存在於原核及真核生物中的胞內銜接蛋白(adaptor protein)。膠質母細胞瘤(GBM)是一種最常見的顱內惡性腫瘤。我們的初步實驗表明，Syntenin在膠質瘤病人樣本和細胞系中異常高表達，且其表達水平與GBM病人的生存率成負相關。RNAi干擾敲除Synteinin可抑制膠質瘤細胞增殖，而Syntenin的過表達可促進細胞生長。我們還發現，在多個膠質瘤細胞系中Syntenin蛋白可通過外泌體（exosome）途徑大量分泌到胞外，且從高表達Syntenin的GBM細胞培養基中分離純化的外泌體可明顯促進GBM細胞的增殖和侵襲，並可促進腦血管內皮細胞的血管新生。本項目將在此基礎上進一步研究Syntenin特別是其分泌蛋白在GBM發生髮展中的生物學功能及分子機制，探討其作為一個新的膠質瘤生物治療靶點以及作為臨床診斷和預後評價的新指標的可行性。
結題摘要
膠質母細胞瘤（glioblastoma, GBM）是最常見的原發性中樞神經系統惡性腫瘤，具有異質性、浸潤生長、易復發、預後差等特點。MDA9參與調控多種腫瘤細胞轉移，且在膠質瘤特別是GBM 中異常高表達。我們發現MDA9可在多個膠質瘤細胞系中通過外泌體(exosome) 途徑分泌到細胞外，提示分泌型MDA9可能是一個新發現的參與膠質瘤發生、發展和侵襲的靶標蛋白，有望作為臨床診斷和治療的新靶點。本課題重點研究了高表達MDA9後，外泌體分泌水平、生物學功能、蛋白組分的變化，並探索了相關的分子機制。主要結果包括：a.MDA9在膠質瘤細胞系中表達升高 ：MDA9基因的過表達和GBM 病人的生存率成負相關關係。而且MDA9蛋白在膠質瘤病人樣本和膠質瘤細胞系中高表達。b.高表達MDA9促進外泌體分泌增多：發現外泌體CD63表達水平與細胞中MDA9表達水平呈正相關。NTA，透射電鏡等檢測發現高表達MDA9細胞分泌的外泌體直徑和數量都有所增加。c.高表達MDA9的外泌體促進膠質瘤細胞的增殖、侵襲及血管發生：高表達MDA9後細胞生長能力顯著增強；而高表達MDA9的外泌體較對照外泌體顯著促進了野生型細胞的增殖、侵襲及血管形態發生；d.高表達MDA9的外泌體更易於被野生型細胞吞噬 ：通過共聚焦觀察及定量檢測，發現高表達MDA9的外泌體更易於被野生型細胞吞噬。e.高表達MDA9的外泌體通過Stat3通路發揮生物學功能：高表達MDA9的細胞較對照細胞中p-Stat3表達水平顯著升高，且MDA9高表達的外泌體更能促進受體細胞Stat3磷酸化。stat3抑制劑WP1066可以明顯抑制MDA9細胞的增殖，以及抑制MDA9-exo引起的受體細胞的侵襲及血管發生。f.相對定量蛋白組學分析：高表達MDA9外泌體及對照外泌體送樣質譜檢測及蛋白組學分析、GO功能富集及KEGG通路富集等，以期發現外泌體MDA9高表達後發生改變的生物學過程，分子功能，細胞組分及信號通路，以及關鍵蛋白。通過本項目，我們期望分泌型MDA9可以作為臨床診斷膠質母細胞瘤惡性程度的一個指標或治療靶點。
