DEAE-纖維素

小離子電量：0.88～1.08meg/dg(dg=dry gram，千克重)。正常PH範圍：2～9.5，蛋白容積：425mg/dg（蛋白體積是指0.01M ph8.5磷酸緩衝液—牛血清白蛋白），蛋白容積/柱體積：60mg/ml每升所需的離子交換劑㎏，柱床體積：0.19（離子交換劑重量的數字考慮到溶脹，容易去除及使用過程中離子離子交換剩餘顆粒），填料密度的狀態為0.05M PH7.5磷酸緩衝液。

基本介紹

• 中文名：DEAE—纖維素
• 英文名：DEAE cellulose DE-23
• 別稱：二乙氨乙基
• CAS登錄號：9013-34-7
• 密度：0.15dg/ml
• 套用：用於柱色譜分析

基本信息

性狀：乾燥纖維狀

用途：用於柱色譜分析，用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等，陰離子交換填料

保存：常溫乾燥封袋保存

使用方法

DEAE—纖維素的活化

稱取IgDEAE32或52，放入5ml量筒中，加蒸餾水浸泡過夜，觀察溶脹後DEAE的體積。根據所需層析柱的柱床體積計算所需DEAE的用量，稱取所需DEAE用蒸餾水浸泡過夜，其間換幾次水，每次除去細小顆粒。抽乾，改用0.5mol/LNaOH溶液浸泡1h以上，抽乾（可用布氏漏斗），用無離子水漂洗，使pH至8左右（用pH試紙檢查）。再改用0.5mol/LHCl溶液浸泡1h以上，去酸溶液，用無離子水洗至pH6左右。本實驗中在用前應以0.0175mol/L，pH6.7磷酸鹽緩衝液，浸泡平衡後使用。

DEAE—纖維素的再生

用過的離子交換劑可以反覆使用，使其恢復原狀的方法俗稱“再生”。再生並非每次用酸、鹼反覆處理，通常只要“轉型”處理即可。所謂轉型就是使交換劑帶上所希望的某種離子，如希望陽離子交換劑帶上NH+4則可用NH4OH浸泡，如希望陰離子交換劑帶上Cl—則用NaCl溶液處理。本實驗中DEAE—纖維素在酸鹼處理後，用0.0175mol/L，pH6.7磷酸鹽緩衝溶液浸泡即可轉型，以HPO4取代DEAE中的OH—。一般由於DEAE—纖維素使用後因帶有大量雜蛋白，所以再生時，先用0.5mol/L NaOH浸洗，用去離子水洗至pH8左右，再轉型，即可再使用。

DEAE—纖維素的保存

介質使用過後，再生，只有介質保存於20%的乙醇中，存放4℃，目的是防止介質滋生細菌；