磷酸緩衝液（PB，Phosphate Buffer），是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩衝液，通常使用的有磷酸鈉緩衝液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸鉀緩衝液（K2HPO4&KH2PO4)，由於它們有二級解離，緩衝的pH值範圍很廣。
基本介紹
- 中文名：磷酸緩衝液
- 外文名：Phosphate Buffer
- 成分：NaH2PO4&Na2HPO4
- 磷酸緩衝液：PH5.7--8.0
主要作用,配製方法,緩衝範圍,濃度計算,優缺點,
主要作用
PB(Phosphate Buffered)，主要用於化學實驗。簡稱：PB或者PB緩衝液
配製方法
0.2M磷酸緩衝液
磷酸緩衝液PH5.7--8.0(0.2M)
甲液：
NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液為31.21g/L，
NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液為27.6g/L。
乙液：
Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液為35.61g/L，
Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液為53.624 g/L ，
Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液為71.64g/L。
磷酸緩衝液PH5.7--8.0(0.2M)
PH | 甲液X(ml) | 乙液Y(ml) | PH | 甲液X(ml) | 乙液Y(ml) |
5.7 | 93.5 | 6.5 | 6.9 | 45 | 55 |
5.8 | 92 | 8 | 7 | 39 | 61 |
5.9 | 90 | 10 | 7.1 | 33 | 67 |
6 | 87.7 | 12.3 | 7.2 | 28 | 72 |
6.1 | 85 | 15 | 7.3 | 23 | 77 |
6.2 | 81.5 | 18.5 | 7.4 | 19 | 81 |
6.3 | 77.5 | 22.5 | 7.5 | 16 | 84 |
6.4 | 73.5 | 26.5 | 7.6 | 13 | 87 |
6.5 | 68.5 | 31.5 | 7.7 | 10.5 | 89.5 |
6.6 | 62.5 | 37.5 | 7.8 | 8.5 | 91.5 |
6.7 | 56.5 | 43.5 | 7.9 | 7 | 93 |
6.8 | 51 | 49 | 8 | 5.3 | 94.7 |
根據要求的PH值,取X毫升甲液與Y毫升乙液,混合均勻即得.
1/15M 磷酸緩衝液
磷酸緩衝液PH4.49--9.18(1/15M)
PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)
4.4 90 10 6.98 64
4.9 40.1 9.9 7.71 7 3
5.29 0.25 9.75 7.58 8 2
5.59 0.5 9.5 7.75 9 1
5.91 19 8.04 9.5 0.5
6.24 2 8 8.2 9.7 0.3
6.47 3 7 8.54 9.75 0.25
6.64 4 6 8.68 9.9 0.1
6.81 5 5 9.18 10 0
乙液：一水磷酸二氫鈉,1/15M溶液含9.2g/L
甲液：二水磷酸氫二鈉,1/15M溶液含11.864g/L
根據要求的PH值,取X毫升甲液與Y毫升乙液,混合均勻即得.
緩衝範圍
磷酸緩衝液的緩衝pH值範圍非常廣泛，可配置各種pH值的酸性、鹼性和中性緩衝液，配製酸性緩衝液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH範圍在1-5；鹼性緩衝液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH範圍在9-12；中性緩衝液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。
濃度計算
通常所說的磷酸緩衝液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度，而不是鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度。正是因為如此，在配製中性緩衝液時，用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，並不影響磷酸根離子的濃度，所得的緩衝液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來的濃度，但是緩衝液中的鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度已經發生變化。
優缺點
磷酸緩衝液的優點：（1）易配製各種濃度的緩衝液；（2）適用的pH值範圍寬，可配置各種pH值的緩衝液；（3）pH受溫度影響較小；（4）緩衝能力強，緩衝液被稀釋後pH變化小。
磷酸緩衝液的缺點：（1）易與常見的鈣離子Ca2+、Mg2+及一些重金屬離子締合形成沉澱；（2）會抑制某些生化反應過程，如抑制某些酶的催化過程等。
