《Caspase-3剪下白血病相關蛋白AML1-ETO的生物學意義》是依託上海交通大學，由盧瑩擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Caspase-3剪下白血病相關蛋白AML1-ETO的生物學意義
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：盧瑩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
染色體t (8; 21)易位產生的AML1-ETO融合基因在M2型急性髓系白血病(AML)的發生中起了重要作用，但它的單獨存在並不足以引起白血病，提示可能需要 第二次打擊。最近，本課題組報導AML1-ETO的誘導表達顯著增強AML細胞的凋亡敏感性。在此基礎上，進一步發現AML1-ETO是Caspase-3的底物，並且AML1-ETO的剪下是其凋亡增敏作用所必需的。本課題將以這些重要發現為基礎，進一步通過逆轉錄病毒系統建立表達野生型AML1-ETO、剪下位點突變體及其剪下片段的小鼠造血祖細胞株和小鼠骨髓移植模型，以在細胞和整體水平深入研究AML1-ETO被Caspase-3剪下在白血病細胞凋亡、分化以及白血病發病過程中的作用和意義。這些原創性研究對於揭示AML1-ETO相關的AML的發生機制具有重要理論意義。同時，對於細胞凋亡機制的認識及其與腫瘤發病學的關係等方面也可能提供新的觀點。
結題摘要
本課題就融合蛋白AML1-ETO突變體和剪下片段對細胞分化的影響和在白血病發病學中的意義進行了系統研究，獲得了一些原創成果: ①分別利用逆轉錄和慢病毒系統，建立了穩定表達野生型AML1-ETO及其突變體的小鼠造血乾祖細胞32Dcl3 細胞株，並研究了AML1-ETO 及其突變體對32Dcl3細胞增殖、分化和凋亡的影響。結果顯示，Mig-AML1-ETO189-752這一剪下片段顯著抑制32Dcl3細胞的增殖和分化；189-752的表達促進VP16所誘導的32Dcl3細胞凋亡，而369-752則對凋亡有顯著的抑制作用；②利用構建的AML1-ETO 慢病毒系統建立了小鼠骨髓移植模型，並觀察了AML1-ETO突變體的體內生物學效應；③收集臨床t（8;21）陽性的AML 病人標本，套用RT-PCR擴增AML1-ETO 基因的cDNA，並進行了序列測定。該研究不僅為探索AML1-ETO 相關的白血病的發生機制提供了重要理論依據，還為細胞凋亡機制的認識及其與腫瘤發病學的關係提供了新的思路。實施期間項目主持人在影響因子8.849的《Cell Death & Differentiation》等國際期刊發表論文3篇，作為負責人獲得教育部高等學校全國優秀博士學位論文作者專項資金和上海交通大學醫學院新“百人計畫”的資助，培養博士研究生2名。
