《AML1-ETO與PRAME在急性髓性白血病發生中的協同作用研究》是依託北京大學，由秦亞溱擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：AML1-ETO與PRAME在急性髓性白血病發生中的協同作用研究
- 項目負責人：秦亞溱
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
約40％急性髓性白血病M2型患者具有AML1-ETO 融合基因，而AML1-ETO融合蛋白只有與其他異常協同作用才能致白血病。我們已在國際上報導：AML1-ETO（+）M2患者PRAME mRNA水平普遍異常增高，中位值高於AML1-ETO（-）M2患者710倍。而AML1-ETO與PRAME之間調控關係的研究國際上未見任何報導。我們就此提出假說：AML1-ETO融合蛋白上調PRAME的表達，PRAME促進AML1-ETO（+）細胞生長、抑制分化及凋亡，AML1-ETO融合蛋白與異常高表達的PRAME協同作用引發白血病。我們擬在AML1-ETO（+）細胞株及M2患者原代白血病細胞兩個層面上研究AML1-ETO與PRAME之間的相互關係、協同作用和調節機制。本研究不僅有助於闡明AML1-ETO（+）急性髓性白血病發病機制，而且為AML1-ETO和PRAME雙靶點聯合治療提供理論依據及新思路。
結題摘要
白血病細胞存在多種分子異常。我們前期工作發現，與其它類型的急性髓性白血病(AML)相比，AML1-ETO(+)AML普遍異常高表達PRAME。為研究它們之間的關係，本課題做了以下工作：（1）將AML1-ETO基因轉染KG-1a或調控A/E-U937細胞導致AML1-ETO表達或升高的同時PRAME明顯升高。通過SiRNA抑制SKNO細胞株AML1-ETO的表達，PRAME表達無明顯變化。說明AML1-ETO直接調控PRAME升高，但是這種調控可能不可逆。（2）通過檢測AML1-ETO(+)AML患者骨髓Ki-67抗原、8色髓系分化相關抗原及PI/Annexin V雙染色發現PRAME表達水平與其增殖、分化及凋亡程度不相關。（3）亞硫酸氫鈉測序法證明PRAME基因啟動子3’端及外顯子1b區+132-+363位點CpG位點甲基化程度與其mRNA水平總體負相關，但存在明顯個體差異，說明甲基化之外其他機制參與調控PRAME的表達。（4）PRAME高表達與低表達的兩組AML1-ETO(+)AML患者基因表達譜明顯不同，明顯上調及下調錶達的基因分別為184和143個，它們分別參與了細胞的增殖、分化及凋亡過程。本課題進行的其他相關分子異常的研究包括：（1）c-KIT突變是AML1-ETO(+)AML常見的分子異常，發生率達36.5%，成人AML1-ETO(+)AML中c-KIT突變是復發和生存的獨立不良預後因素。（2）WT1與PRAME類似，均為泛白血病分子標誌，在AML1-ETO(+)AML中亦普遍過表達，初診AML1-ETO(+)AML中WT1低表達是復發和生存的獨立不良預後因素。（3）PRAME在骨髓增生異常綜合徵患者中普遍高表達並且有更高程度增加的患者比例明顯多於WT1，PRAME聯合WT1是監測其微小殘留病的好的分子組合。（4）硼替佐米能夠明顯降低PRAME表達水平增高的多發性骨髓瘤患者的復發而不影響PRAME表達水平正常患者的療效。（5）CBFB-MYH11(+)AML與AML1-ETO(+)AML密切相關，同屬於CBF-AML，治療隨訪期間分子異常CBFB-MYH11mRNA水平可以分層患者，異基因造血幹細胞移植明顯改善分子反應差患者療效。本課題有關PRAME及其它相關分子異常的研究有助於我們探索AML等血液惡性腫瘤發病機制、尋找預後指標及治療靶點，從而推進個體化治療以提高療效。
