《CD44調控肝癌細胞侵襲偽足形成及其機制的研究》是依託東北大學，由趙蒲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CD44調控肝癌細胞侵襲偽足形成及其機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙蒲
- 依託單位：東北大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝癌發病率高，侵襲轉移是肝癌致死的主要原因，現有治療措施尚不能有效控制肝癌侵襲轉移，因此深入探討其機制，尋找有效的治療靶點是肝癌治療研究領域的熱點。近期研究表明，CD44分子參與肝癌的發生髮展過程，與肝癌細胞侵襲轉移和肝癌手術預後密切相關。本項目擬對CD44選擇性剪下變異體(CD44s和CD44v)在肝癌細胞侵襲偽足形成中的作用及其機制進行系列研究，明確參與侵襲偽足形成的CD44剪下變異體類型；並以CD44與Integrin β1和Annexin II 相互作用為切入點，通過阻斷Integrin β1信號通路及CD44和Annexin II的相互作用，分析CD44在侵襲偽足始發過程中黏著斑和侵襲偽足相互轉換中的作用；圍繞Integrin β1/FAK/Src和AnnexinII/PIP2/Tks5兩條信號通路解析CD44促進肝癌細胞侵襲偽足形成的分子機制，為尋找有效的肝癌治療靶點奠定基礎。
結題摘要
肝癌是嚴重影響人類健康的惡性疾病，居世界腫瘤死因第三位。儘管以外科手術切除為基礎的 綜合治療在原發性肝癌的治療上已經取得了長足進展。但肝癌患者的總體5年生存率仍較低。侵襲和轉移是肝癌致死的重要原因。因此，揭示肝癌細胞侵襲轉移的細胞和分子機制，尋找更為有效的治療手段是肝癌研究領域的熱點內容之一。近期研究表明，CD44 分子參與肝癌的發生髮展過程，與肝癌細胞侵襲轉移和肝癌手術預後密切相關。本項目對CD44 選擇性剪下變異體(CD44s 和CD44v)在肝癌細胞侵襲偽足形成中的作用及其機制進行系列研究，明確了CD44s是參與肝癌細胞侵襲偽足形成的主要CD44剪下變異體類型；下調CD44分子能抑制細胞PTPRB的表達，影響Src 527位酪氨酸磷酸化，進而促進Src的活化。然而CD44分子表達下調後會通過Integrin β1/FAK信號通路，上調FAK 397酪氨酸磷酸化。而磷酸化後的FAK則在空間上束縛了活化的Src，因此，下調CD44表達後，雖然活化的Src分子增多，但由於活化的Src均被磷酸化的FAK束縛於黏著斑部位，從而無法發揮其促進侵襲偽足的功能。由此可見，當下調CD44表達時，黏著斑無法解聚釋放出活性Src，進而抑制了侵襲偽足的形成過程。 本實驗還採用免疫共沉澱的方法證實了在CD44分子能與鈣離子依賴的膜磷脂結合蛋白Annexin II分子發生相互作用。而AnnexinII分子為PI(4,5)P2的結合蛋白，且PI(4,5)P2的結合蛋白Dynamin 2能通過加速Integrin β1內化，而促進黏著斑的解聚。因此我們推測下調CD44分子後Annexin II分子不能與CD44分子相結合，因此間接降低了PI(4,5)P2及其結合蛋白Dynamin2在黏著斑周圍的聚集，進而降低了黏著斑的解聚速度，使黏著斑更為穩定。此外沉默CD44能顯著抑制Annexin II分子酪氨酸磷酸化。通過免疫共沉澱實驗發現，下調CD44分子表達後，與pY397-FAK結合的Annexin II蛋白顯著減少，提示CD44分子通過與Annexin II結合，促進並保護AnnexinII的磷酸化，進而募集PI(4,5)P2及其結合蛋白Dynamin2到達黏著斑部位，從而加速黏著斑的解聚。
