《IER2在肝癌轉移中的作用機制研究》是依託揚州大學，由沈維乾擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：IER2在肝癌轉移中的作用機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：沈維乾
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
前期工作表明，IER2可以抑制小鼠黑色素瘤B16BL6細胞的體內肺轉移，調控細胞中張力纖維和絲狀偽足的形成；IER2可以和細胞中轉錄因子Sp-1結合，顯著上調整合素 β1啟動子的轉錄活性；過表達IER2可以上調SMMC-7721細胞中整合素 β1、p-FAK（Y397），下調p-Src（Y527），提示IER2可能對整合素 β1直接轉錄調控，通過整合素介導的信號通路調控腫瘤細胞遷移和腫瘤轉移。本課題將首先在細胞水平明確IER2可能通過對整合素的轉錄調控影響整合素介導的通路來調節與絲狀和片狀偽足、張力纖維形成相關的Rho GTP酶的表達及其活性而調控腫瘤細胞遷移和腫瘤的轉移；最後在組織水平和動物模型水平來驗證細胞水平得到結果，明確IER2在腫瘤轉移中的作用及其機制。本研究將有助於完善我們對腫瘤轉移的基因調控這一複雜病理過程的理解，也有可能為腫瘤治療提供新靶標。
結題摘要
迄今為止的研究表明，IER2基因的表達產物可能是一種核蛋白，在一系列細胞應答反應中可能作為一種轉錄調控因子或早期轉錄因子發揮作用，本項目前期研究表明，IER2可以調控肝癌細胞的遷移，而最近也有研究表明IER2可能參與調控結腸癌的發生和轉移，但其確切的機制仍不清楚。為了探討IER2在肝癌的發生和轉移中的作用及機制，本課題從組織水平、細胞水平和動物模型水平開展了研究。首先，在組織水平和細胞水平研究證實IER2的異常表達與肝癌的發生、發展、惡化程度以及轉移密切相關，且IER2表達與整合素1（ITGB1）和N-Cadherin的表達呈正相關並與肝癌細胞的遷移潛能相關。其次，在肝癌細胞中利用慢病毒介導的IER2過表達和干擾表達，發現IER2過表達可以促進肝癌細胞的遷移、侵襲、細胞離散以及在Fibronectin上的黏附和鋪展，而IER2干擾表達則可以促進肝癌細胞與細胞之間排列緊密、抑制細胞離散以及與Fibronectin的黏附和鋪展；同時，研究表明IER2通過調控FAK介導的信號通路調控肌動蛋白細胞骨架纖維的裝配影響血管內皮細胞的遷移、侵襲以及體外血管形成過程，而且研究還發現miR-30c可以通過直接和功能性地靶定肝癌細胞中的IER2而負調控肝癌細胞的遷移。進一步研究發現，IER2的表達可以激活細胞中ITGB1-FAK-Src-PXN、ITGB1-FAK-Src-MAPK（ERK和p38）和ITGB1-FAK-Src-Akt等信號通路而調控細胞中Rho GTP酶活性和促進上皮間質轉化（EMT）等通路，從而影響肌動蛋白細胞骨架的裝配，影響細胞中張力纖維、片狀偽足和絲狀偽足的形成，調控肝癌細胞的遷移、侵襲和與基質的黏附過程。螢光素酶報告基因實驗和染色質免疫共沉澱實驗，證實IER2可以調控ITGB1的轉錄；蛋白組學研究表明，IER2可與細胞內E2F和MOB2等相互作用，並發現MOB2可以負調控肝癌細胞的遷移和侵襲。最後，通過建立自發性體內轉移裸鼠模型和實驗性體內轉移裸鼠模型，發現IER2過表達和干擾表達均可以促進移植瘤的生長以及癌細胞的轉移。本研究結果表明，IER2可以通過整合素介導的信號通路調控肝癌細胞的遷移、侵襲和黏附，促進肝癌的生長和轉移，該研究結果將有助於完善我們對肝癌發生及轉移的基因調控這一複雜病理過程的理解，也有可能為肝癌治療提供新靶標。
