《類胰蛋白酶激活心房成纖維細胞的機制研究》是依託同濟大學，由譚紅偉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：類胰蛋白酶激活心房成纖維細胞的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：譚紅偉
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
心房纖維化是房顫發生與維持的重要基質之一，但其確切機制尚不清楚。本課題組的前期研究結果發現①房顫患者心房組織類胰蛋白酶水平升高；②類胰蛋白酶刺激心房成纖維細胞增殖。因此我們假設類胰蛋白酶激活心房成纖維細胞可能是心房纖維化形成的重要機制之一。基於上述假設，本研究擬體外培養心房成纖維細胞，給予類胰蛋白酶、類胰蛋白酶特異性抑制劑（APC2095），採用BrdU法評價成纖維細胞增殖，Transwell小室法評價細胞遷移，免疫組化及Westren-blot檢測細胞外基質重構，實時定量PCR及Western-blot檢測TGF-β、IL-6、內皮素-1等水平；並予以細胞蛋白酶活化受體2特異性阻滯劑（FSLLRY）、血小板源性生長因子受體抗體、過氧化增殖體激活受體γ阻滯劑干預，明確類胰蛋白酶激活心房成纖維細胞的機制。這些結果將促進對心房纖維化機制的認識，進而為更好的預防、治療房顫提供重要的理論依據。
結題摘要
本研究在為期三年的研究期內，選擇9周齡雄性Sprague-Dawley大鼠，全麻無菌條件下獲取大鼠心房組織，分離培養大鼠心房成纖維細胞，體外原代培養。選擇生長良好的2-4代心房成纖維細胞，給予類胰蛋白酶、APC366、FSLLRY、APA5及BADGE干預24、72小時後，收集細胞。採用Edu檢測法評價對心房成纖維細胞增殖的影響、Transwell小室法檢測心房成纖維細胞的遷移能力變化；採用Masson染色及免疫細胞化學及Western-blot檢測對心房成纖維細胞纖維化指標的影響。 本研究結果發現：（1）類胰蛋白酶增強心房成纖維細胞的增殖、遷移能力，加重細胞纖維化。（2）類胰蛋白酶通過激活蛋白酶活化受體2（PAR2）促進成纖維細胞增殖，加重細胞纖維化。（3）類胰蛋白酶通過激活血小板源性生長因子受體促進心房成纖維細胞遷移。 結論：類胰蛋白酶激活心房成纖維細胞，促進心房成纖維細胞增殖、遷移，加重心房纖維化；其作用機制為激活蛋白酶活化受體2及血小板源性生長因子受體。
