雌激素受體β在腎臟纖維化發生中的作用及其作用機制

《雌激素受體β在腎臟纖維化發生中的作用及其作用機制》是依託深圳大學，由曹榮擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：雌激素受體β在腎臟纖維化發生中的作用及其作用機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：曹榮
• 依託單位：深圳大學

項目摘要

慢性腎臟病（CKD）嚴重危害人類健康，腎臟纖維化是慢性腎臟病的共同病理改變，但其機制不詳，尚缺少有效治療方法。雌激素通過改善腎纖維化保護腎臟，且預實驗結果發現，在人和小鼠纖維化腎組織中，雌激素受體β（ERβ）表達明顯下調，激活ERβ可抑制腎小管細胞膠原分泌，提示ERβ在腎纖維化中具有保護作用。鋅指蛋白1（Snail1）可誘導小管細胞EMT而加重腎纖維化。申請人發現，在原代小管上皮細胞中激活ERβ顯著降低了snail 1的表達。因此提出科學假說：激活ERβ可通過抑制Snail1而減少小管細胞EMT，最終改善腎臟纖維化。本項目擬：1）體內使用ERβ激動劑及ERβ敲除小鼠研究ERβ在腎纖維化中的作用；2）培養原代小管上皮細胞，研究ERβ在細胞EMT中的作用；3）探究Snail1在ERβ改善小管細胞EMT中的作用；4）明確CKD病人腎Snail1表達變化。以期為腎臟纖維化治療提供新的潛在靶點。

結題摘要

慢性腎臟病（CKD）嚴重危害人類健康，腎臟纖維化（Renal Fibrosis）是慢性腎臟病的共同病理改變，但其機制不詳，尚缺少有效治療方法。已有文獻報導雌激素具有抗腎臟纖維化作用，能夠延緩慢性腎臟疾病的進展，但是雌激素究竟是通過哪種受體發揮抗腎臟纖維化作用的目前仍然不清楚。本項目運用動物實驗、細胞實驗和分子生物學實驗研究了雌激素受體β（ERβ）在腎臟纖維化中的作用及其作用機制。首先本項目明確了ERβ在野生型C57小鼠腎臟中的定位，其主要表達在近端小管上皮細胞。左側輸尿管梗阻腎臟纖維化模型（UUO）中ERβ表達明顯下調，ERβ基因敲除可以加重腎臟纖維化損傷，ERβ特異性激動劑能夠明顯改善腎臟纖維化損傷，敲除Smad3基因或者使用Smad3特異性抑制劑能夠阻斷ERβ的抗纖維化作用。為了探究其作用機制，我們培養了原代近端腎小管上皮細胞（PTECs），發現PTECs細胞中存在ERβmRNA和蛋白的表達，與此同時，我們還使用了小鼠腎小管上皮細胞系MTCs,我們也檢測到了ERβmRNA和蛋白的表達。TGFβ1可以計量依賴性降低ERβmRNA和蛋白的表達，然而ERβ激動劑WAY200070處理能夠明顯減少TGFβ1誘導的MTCs細胞a-SMA和膠原I表達的增加，並且這種作用及計量依賴性的。進一步研究發現Smad3能夠特異性與ERβ啟動子上游SBE結合，抑制ERβ轉錄，從而加重腎臟纖維化進展。本項目明確了ERβ是Smad3的直接靶基因，ERβ激活能夠改善腎臟纖維化，開發ERβ特異性激動劑有望用來治療腎臟纖維化。在本項目的資助下，於Am J Physiol Renal Physiol, Kidney Dis (Basel)發表文章2篇，此外文章“ERβ attenuates renal fibrosis through the TGFβ/Smad3 pathway” 目前正投稿於PNAS（IF:9.89）。