《miR-29b在Ang-II誘導腎小管上皮間充質轉分化中的作用》是依託杭州師範大學，由張菊紅擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-29b在Ang-II誘導腎小管上皮間充質轉分化中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張菊紅
- 依託單位：杭州師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
高血壓與腎臟纖維化互為因果，形成惡性循環。AngII促使細胞外基質的生成和降解失調，使組織發生重構，其中腎小管上皮-間充質轉分化（EMT）是腎臟纖維化的重要階段，其具體機制尚未闡明。miR29家族被證明參與多個臟器的纖維化。本課題組首次發現miR-29b 在自發性高血壓大鼠腎臟皮質表達顯著下調，體外實驗觀察到mi-29b逆轉AgII誘導TGF-ß1途徑依賴的腎小管EMT。miR29b在腎小管EMT發生髮展中的作用迄今尚無報導。因此，我們推測miR29b對的AngII誘導的腎臟纖維化具有重要調節作用，可能成為新的防治靶點。為證實這一假說，擬採用分子生物學技術，從整體-組織-細胞三個層次，觀察慢病毒介導的miR29b轉染細胞發生EMT情況；探索體內轉染miR29b對高血壓腎臟纖維化的保護作用及其機制。我們將從新的視覺研究高血壓腎臟纖維化發生的分子機制，並為腎臟纖維化的防治提供新靶點。
結題摘要
高血壓誘導的靶器官損害以上皮細胞間充質轉分化和間質纖維化為特點。然而，纖維化發生的分子機制尚不清楚。非編碼RNA在纖維化發生中的作用已受到廣泛關注，。非編碼RNA 架起了信號分子之間相互作用的橋樑。本課題在前期研究的基礎上，以非編碼RNA 做為研究對象，探索其在RAAS系統激活誘導的心臟及腎臟靶器官損害中的作用和分子機制，並在小鼠體內進行了microRNA-29b體內轉導干預抗血管緊張素II誘導腎臟和心臟靶器官損害的研究,，在原研究計畫基礎上有新的發現，發現鹽皮質激素受體激活誘導腎臟纖維化的分子機制。 本課題研究內容包括以下三部分： 1. 做為腎素-血管緊張素-醛固酮系統的核心分子，鹽皮質激素受體的激活可以在轉錄後水平調節非編碼RNA的表達，但具體的分子機制沒有闡明。本課題第一部分研究通過體外腎小管上皮細胞中研究TUG1得到以下結論：①lncRNA TUG1 和miR-29bTUG1以序列特異性方式結合，在轉錄後水平調節彼此表達；②首次發現敲減TUG1能夠改善AngII刺激引起的促纖維化分子表達，而這一作用可以通過抑制miR-29b逆轉，提示miR-29b介導了TUG1調節腎小管上皮間質纖維化作用，二者均是潛在腎臟纖維化調節分子；③鹽皮質激素受體與TUG1以直接結合的方式在轉錄後水平調節其表達，提示TUG1-miR-29b可能是鹽皮質激素受體激活至靶器官纖維化的“分子橋樑”。 2. 已有的研究及本研究結果均提示miR-29b在多種器官纖維化中影響細胞外基質沉積。本課題採用昆蟲桿狀病毒系統合成重組腺相關病毒（rAAV9）做為載體，小鼠血管緊張素II持續灌注28天造模小鼠進行腎臟原位注射miR-29b轉導。體內試驗結果顯示：rAAV9-miR-29b轉導小鼠模型腎臟促纖維化因子表達、細胞外基質沉積、腎小管上皮細胞壞死及血漿肌酐水平均顯著緩解。結果提示：rAAV9-miR-29b在體內具有抗AngII誘導的腎臟纖維化作用。 3. 本課題採用尾靜脈注射rAAV9-miR-29b轉導小鼠心臟，AngII持續灌注28天后繼續飼養10周製造小鼠纖維化及心臟功能受損模型，結果顯示rAAV9顯著提高模型小鼠心臟射血分數、左心室收縮率，顯著改善心臟間質纖維化及心肌細胞凋亡。以上結果提示rAAV9介導的miR-29b體內轉導可以抑制AngII誘導的心臟纖維化及心功能損害。
