《HBX介導的腎小管上皮細胞免疫調節作用研究》是依託上海交通大學，由袁偉傑擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：HBX介導的腎小管上皮細胞免疫調節作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：袁偉傑
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腎小管及間質炎細胞浸潤及局部免疫微環境紊亂是造成腎臟局部損傷的重要因素。而腎小管上皮細胞（REC）作為非專職的抗原呈遞細胞，可藉助TLR4調節固有免疫和獲得性免疫，參與局部免疫微環境的形成。課題組前期工作已發現B肝腎（HBV-GN）REC中存在TLR4的異常表達，過度激活固有免疫，誘發細胞內的炎症反應。本課題擬以反式激活因子HBX為誘因，將通過體內、外實驗深入探討HBX介導的REC免疫調節作用，同時初步研究可影響REC分化的Notch1信號通路在REC介導的局部免疫微環境紊亂中的作用。套用RNA干擾和基因轉染等技術研究HBX對REC分化、免疫相關分子表達格局、T細胞免疫及固有免疫的影響；對HBX轉染的REC套用基因晶片篩選Notch信號通路差異表達基因；繼而以Notch1信號分子為靶點，干預REC分化，改善局部免疫微環境紊亂，以減輕免疫損傷，為HBV-GN的臨床治療提供理論依據。
結題摘要
腎臟損傷是HBV感染最常見的一種肝外併發症，我國是HBV感染高發地區，B肝相關性腎炎（Hepatitis B Virus-related glomerulonephritis, HBV-GN）已成為我國主要的繼發性腎臟疾病之一。HBV能侵襲腎小管上皮細胞，在腎小管上皮細胞中轉錄、複製，引起腎臟病理損傷，在HBV-GN的發生髮展中發揮重要作用。而HBx是HBV複製所必須的轉錄因子，具有反式激活作用，可通過反式調控同源/異源的病毒/細胞轉錄調節序列，促進病毒複製，誘導細胞凋亡，引起炎性反應的發生，在細胞轉化、增殖中起重要作用。故本項目系統的研究：（1）HBx對腎小管上皮細胞免疫調節作用的影響；（2）HBx對腎小管上皮細胞激活T細胞及巨噬細胞作用的影響；（3）Notch1受體在HBx介導的腎小管上皮細胞免疫活性異常中的作用。 在本項目執行期間，我們首次發現了HBx質粒轉染腎小管上皮細胞系HK-2細胞後可引起細胞數目和形態的變化，促進腎小管上皮細胞凋亡，誘導腎小管上皮細胞發生上皮-間充質細胞轉分化，也誘導其表面MHC-Ⅱ分子及共刺激分子CD40的表達增加，使其表現出抗原提呈細胞的活性。當進一步將HBx轉染的HK-2細胞與T細胞及巨噬細胞共培養之後發現，HK-2細胞能誘導CD4+T活化，細胞增殖增加，並誘導CD4+T細胞向Th1方向分化；HBx轉染的HK-2細胞亦能激活巨噬細胞，導致其釋放趨化因子和炎症因子。此外通過HBV-GN小鼠動物模型亦驗證了腎小管上皮細胞具有抗原提呈細胞活性，高表達MHC-Ⅱ、CD40分子，誘導腎小管間質T細胞及巨噬細胞浸潤增加。我們亦證實了Notch1受體在HBx介導腎小管上皮細胞增殖、凋亡、轉分化及免疫活性異常中的起到重要作用。上調Nocth1的表達可促進腎小管上皮細胞的凋亡及轉分化，增強其抗原提呈活性，加重炎症免疫反應。本研究深入探討了HBV-GN進展的可能機制，為臨床治療HBV-GN提供了新的潛在靶點及理論依據。
