Snail1調控STOML2的表達在糖尿病腎病EMT發生中的作用及機制研究

《Snail1調控STOML2的表達在糖尿病腎病EMT發生中的作用及機制研究》是依託南昌大學，由何鳳擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Snail1調控STOML2的表達在糖尿病腎病EMT發生中的作用及機制研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：何鳳
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

糖尿病腎病（DN）是糖尿病常見且難治的微血管併發症。已知腎小管上皮細胞-間質轉化（EMT）是DN腎間質纖維化發生髮展的核心環節，但目前DN過程中EMT發生的機制尚不明確。我們在前期研究中，發現Snaill在DN腎組織中呈特異性高表達，上調錶達Snail1能誘導腎小管上皮細胞EMT發生，進一步通過蛋白質組學篩選鑑定出STOML2在穩定過表達Snail1的細胞中表達明顯升高，並且套用生物信息學預測到STOML2啟動子區域存在Snail1的結合位點。我們提出Snail1介導 EMT的可能機制：即DN時Snail1通過轉錄激活STOML2表達並促進EMT發生。本項目擬採用CHIP-PCR、EMSA等方法證實Snail1轉錄激活STOML2，並探討這一事件對EMT的重要性和意義。本研究有望揭示一種新的糖尿病腎病EMT發生機制，為臨床防治糖尿病腎病提新的思路和方法。

結題摘要

糖尿病腎病（Diabetic nephropathy, DN）是糖尿病常見且難治的微血管併發症。現有研究表明，腎小管間質纖維化是DN進展為ESRD的主要病理基礎，上皮-間質細胞轉化（Epithelial- mesenchymal transition，EMT）被認為是腎間質纖維化發生髮展的核心環節之一。Snail1是誘發DN腎纖維化的關鍵性因子，可以啟動腎小管上皮細胞EMT的發生髮展。 本研究發現Snail1在2型DN腎組織中呈特異性激活高表達，通過雙向電泳篩選Snail1高表達及對照細胞的差異表達蛋白，驗證發現Snail1能上調STOML2的蛋白及mRNA水平，遂提出進一步研究Snail1在糖尿病腎病EMT發生中的作用及機制，為闡明糖尿病腎病腎纖維化發生的分子機制提供實驗依據。 本研究重要研究結果： 1．Snail1在DN腎組織中表達明顯上調，穩定高表達Snail1可誘導腎小管上皮細胞發生EMT。 2. 雙向電泳篩選Snail1高表達及對照細胞的差異表達蛋白，驗證結果顯示Snail1能上調STOML2的蛋白及mRNA水平。 3. 生物信息學預測分析顯示STOML2基因啟動子區域有1個推定的Snail1結合位點，通過螢光素酶報告基因分析及ChIP實驗充分證實Snail1能直接轉錄調控STOML2基因的表達。 4. 腎小管上皮細胞特異性敲除Snail1基因能減輕糖尿病腎病的纖維化程度。進一步在動物體內下調 STOML2的表達，能減輕糖尿病腎病小鼠的血糖，血肌酐，尿白蛋白/肌酐及腎臟纖維化程，具有治療作用。