基本介紹
還原性糖,概念,性質,還原性質,鑑定方法,實驗原理,所需試劑,實驗材料準備,操作方法,其他說明,
還原性糖
概念
斐林試劑以及由檸檬酸、硫酸銅與氫氧化鈉配製的本尼迪特試劑（班氏試劑）常與醛糖及酮糖在水浴加熱的條件下反應產生氧化亞銅磚紅色沉澱，即試劑本身被還原，所以凡能與上述試劑發生反應的糖稱為還原糖（reducing sugar)，凡不能與上述試劑發生反應的糖稱為非還原糖（non reducing sugar），糖苷不能發生上述反應。葡萄糖分子中含有游離醛基，果糖分子中含有游離酮基，乳糖和麥芽糖分子中含有游離的醛基，故它們都是還原糖。
非還原性糖有蔗糖、澱粉、纖維素等，但它們都可以通過水解生成相應的還原性單糖。
性質
能夠還原斐林(H.von Fehling)試劑(本尼迪特試劑）或托倫斯(B.Tollens)試劑的糖稱為還原糖，所有的單糖（除二羥丙酮），不論醛糖、酮糖都是還原糖。大部分雙糖也是還原糖，蔗糖例外。斐林試劑是含Cu2+絡合物的溶液，被還原後得到磚紅色Cu2O的沉澱。托倫斯試劑被還原後能生成單質銀，發生“銀鏡反應”。
分子結構中含有還原性基團（如游離醛基或游離酮基）的糖，叫還原糖。如葡萄糖。
果糖含有游離的酮基，所以果糖也屬於還原糖。
還原性質
所有單糖（除二羥丙酮）及大部分二糖（除蔗糖等）在本尼迪克特試驗中呈陽性反應，所以大部分單糖及二糖都具有還原性。
鑑定方法
實驗原理
斐林試劑法
還原糖與斐林試劑發生作用，可以生成磚紅色沉澱。
所需試劑
斐林試劑（主要由質量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液和質量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液配製而成）
注意：現配現用
實驗材料準備
植物組織是常用的實驗材料,但必須加以選擇。本實驗最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,或近於白色的,如蘋果和梨的果實。經試驗比較,顏色反應的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿蔔。
操作方法
①向試管內注入2mL待測組織藥液
②向試管內注入1mL斐林試劑（甲液和乙液等量混合均勻後再注入）
③將試管放入盛有50～65℃溫水的大燒杯中加熱約2min
④觀察試管中出現的顏色變化
其他說明
斐林試劑和班氏試劑等都是檢驗還原性糖的試劑，二者的使用方法及原理、成分有區別。下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結。
1. 斐林試劑和雙縮脲試劑
斐林試劑和雙縮脲試劑都由NaOH溶液和CuSO4溶液組成，但二者有如下三點不同：
（1）溶液濃度不同
斐林試劑中溶液為斐林試劑甲(NaOH溶液)其濃度為0.1g/ml,斐林試劑乙(CuSO4溶液)其濃度為0.05g/ml；雙縮脲試劑:雙縮脲試劑A(NaOH溶液)的濃度為0.1g/ml，雙縮脲試劑B(CuSO4溶液)的濃度為0.01g/ml。
（2）使用原理不同
斐林試劑是新配製的溶液，它在加熱條件下與醛基反應，被還原成磚紅色的沉澱，可用於鑑定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑑定可溶性還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色→棕色→磚紅色（沉澱）。
鑑定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在鹼性環境下的與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲（）結構相似的肽鍵，所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應，可以用雙縮脲試劑鑑定蛋白質的存在。
（3）兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙可強烈產生，很容易沉澱析出，因此斐林試劑一般為現用現配；而班氏試劑的配方中，檸檬酸鈉為一對緩衝物質，產生的數量有限，與溶液混合後產生的濃度相對較低，不易析出，因此該試劑可長期保存。
當然，無論用班氏試劑還是斐林試劑，歸根結底都是與醛基在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的沉澱，兩者反應現象一樣，這就是二者的相同之處。
（4）備註：
在酸性環境中，Cu2 會變得較為穩定，不容易發生反應，所以不能進行試驗。
醇和醛在這測試亦會產生磚紅色沉澱物，因為兩者都具有在這試驗中產生作用的官能團。
