國家標準《肌動蛋白抗體的檢測 免疫印跡法》 由TC387(全國生化檢測標準化技術委員會)歸口 ,主管部門為國家標準化管理委員會。
2021年5月21日,《肌動蛋白抗體的檢測 免疫印跡法》由國家市場監督管理總局、中國國家標準化管理委員會發布,並於2021年12月1日實施。
基本介紹
- 中文名:肌動蛋白抗體的檢測 免疫印跡法
- 頒布時間:2021年5月21日
- 實施時間:2021年12月1日
- 發布單位:國家市場監督管理總局、中國國家標準化管理委員會
國家標準《肌動蛋白抗體的檢測 免疫印跡法》 由TC387(全國生化檢測標準化技術委員會)歸口 ,主管部門為國家標準化管理委員會。
2021年5月21日,《肌動蛋白抗體的檢測 免疫印跡法》由國家市場監督管理總局、中國國家標準化管理委員會發布,並於2021年12月1日實施。
國家標準《肌動蛋白抗體的檢測 免疫印跡法》 由TC387(全國生化檢測標準化技術委員會)歸口 ,主管部門為國家標準化管理委員會。2021年5月21日,《肌動蛋白抗體的檢測 免疫印跡法》由國家市場監督管理總局、中國國家標準...
免疫印跡法是將蛋白質轉移到膜上,然後利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測, 具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或...
抗Jo-1抗體是最常見的肌炎特異性自身抗體,參與了疾病的免疫病理過程,對炎性肌病的診斷、鑑別診斷以及分類有重要的作用。抗Jo-1抗體常用的檢測方法有酶聯免疫吸附試驗、免疫印跡法等。病因 多發性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)是一種較常見的風濕性疾病,病因未明。常累及近端肢帶肌,頸肌和咽肌等,皮膚、心臟、胃腸...
本項研究將採用DNA分子克隆、流式細胞術、免疫螢光、免疫電鏡、蛋白質免疫印跡、免疫沉澱、細胞培養和傳染、體外基因轉錄等技術方法,探討①肌動蛋白與核骨架、轉錄因子、ATP酶、BAF複合物及RNA聚合酶等的動態聯繫,②肌動蛋白通過影響染色質結構參於基因轉錄調控的分子基礎和機制。
該網路位於核內的非染色質區及核仁腔隙,並且與核仁及核膜相連,分裂中期轉移到染色體周邊;用電鏡DGD色埋去色埋劑技術也證明核內的非染色質區及染色質胞轉移初期核內出現的無色透明區內也色含有非染色質性纖維網路;用Rh-ph探針及斑點免疫印跡法證明分離出的百合花粉母細胞的核基質內色含有一定量的肌動蛋白組分。
免疫印跡法測得抗rRNP主要有38KD、16KD、15KD三條蛋白多肽。抗rRNP抗體主要見於SLE,常在SLE活動期中存在,陽性率在10%~20%左右,是診斷SLE的特異性抗體。如僅有抗rRNP抗體陽性的SLE患者,ANA常為陰性。抗rRNP抗體陽性患者中樞神經系統病變發生率高。抗rRNP抗體與抗dsDNA抗體的消長相平行,但與抗dsDNA抗體不同...
抗核糖體P蛋白抗體,即anti-P抗體,其是系統性紅斑狼瘡的特異性抗體,通常使用酶聯免疫吸附法(ELISA)、免疫雙擴散法(ID)和免疫印跡法(IBT)對血清進行檢測抗核糖體P蛋白抗體,在其他疾病和正常人中很少見。近來有研究表明,抗核糖體P蛋白抗體與紅斑狼瘡的神經精神損害有很大的相關性,認為其與系統性紅斑狼瘡患者肝臟...
可提取性核抗原(ENA)又稱可溶性核抗原,指的是細胞核在鹽水中可以溶解的一部分抗原成分。抗ENA抗體,屬於抗非組蛋白抗體,包括6種抗體,即抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗Scl-70抗體和抗Jo-1抗體。常用免疫雙擴散法和免疫印跡法進行檢測。不同的抗ENA抗體在各種瀰漫性結締組織病中的陽性率有...
據此來判斷抗ENA抗體的有無。該法主要用於檢測抗Sm和抗U1-RNP抗體,其優點是較瓊脂糖擴散法敏感、快速,可於2h觀察結果。(2)免疫印跡法:將ENA抗原進行聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE),使所含多肽抗原分離;再用電轉印法將抗原轉印於硝酸纖維素膜上。將待測血清與膜條上的抗原反應,用酶標記抗人IgG作為二抗,...
抗RNP抗體在其他自身免疫病檢出率不高。其檢測方法包括免疫印跡法和間接免疫螢光法以及酶聯免疫吸附試驗。它作為一種標記性抗體,在診斷和鑑別診斷紅斑狼瘡與混合性結締組織病上有重要意義,但是與疾病的活動和穩定無關。適應證 進行抗核糖核蛋白抗體檢測的指征有:①系統性紅斑狼瘡。②混合性結締組織病。③硬皮病。臨...
免疫印跡法 免疫印跡法(immunoblotting)血清脫脂後,經IEF電泳將ApoE與其他蛋白質分離,然後將凝膠中蛋白質轉移到硝酸纖維素(NC)膜上,用抗ApoE抗體作為一抗進行免疫印跡反應或採用直接的免疫固定法,即可靈敏而特異地顯示出ApoE區帶的位置,從而確定ApoE表型。此方法利用抗原-抗體的特異反應,排除了血清其他蛋白質的...
檢查過程 採用瓊脂擴散法或對流免疫電泳檢測,近年亦有用免疫印跡法檢測的,抗NNA抗體中主要包括抗Sm和nRNP等七種抗體,mRNP或U1RNP抗原為七種分子量不同的蛋白質(12-68KD)與U1RNA(U為尿嘧啶核苷酸)結合的複合物;而Sm為同樣七種蛋白質與U2、U1、U4、U5、U6RNA所形成的複合物;抗Sm抗體在SLE的陽性率為20%-25...
抗U1RNP抗體(抗70kD)陽性與肌炎、食道運動功能障礙,雷諾現象相關,但陽性患者多不發生腎炎。注意事項 免疫印跡的優點是一次可同時檢測7種多肽抗體,但其與對流免疫電泳法或瓊脂雙向擴散法比較陽性率並無顯著提高,(主要原因是靶抗原經過熱變性,使原先存在於分子表面抗原表位發生了改變)。因此相應多肽抗體陰性,並不能...
U1-RNP則否,故也可將ENA抗原加熱處理後再與待測血清作對流免疫電泳,即可判定沉澱線性質。也有文獻報導,套用核糖核酸酶處理U1-RNP。以區別抗Sm或抗U1-RNP抗體。(2)免疫印跡法的優點是一次可同時檢測7種多肽抗體,但其與對流免疫電泳法或瓊脂雙向擴散法比較,陽性率並無顯著提高(主要原因是其作用的靶抗原多經過...
免疫印跡法(Immunoblotting)目前此技術為診斷此症最有力的工具,又稱為西方墨點轉漬法(Western blotting),為檢測細胞或體液中特定的微量蛋白質。患者之中約90%檢測不到ATM蛋白,約10%的患者檢測得到極小量(trace amounts),1%的患者則有正常的ATM蛋白量,但無kinase活性(kinase-dead)。輻射線敏感度試驗(...
檢查 1.組織病理學檢查 病變腦組織可見海綿狀空泡,澱粉樣斑塊,神經細胞丟失伴膠質細胞增生,極少白細胞浸潤等炎症反應。2.免疫學檢查 多種免疫學方法,如免疫組織化學,免疫印跡,酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等,已用於檢測組織中的PrPsc,採用抗PrP27~30抗體,可在經異硫氰酸胍及壓熱處理或蛋白酶K消化溶解PrPc後的...
在此基礎上,用免疫印跡法和螢光定量PCR檢測調控破骨細胞骨架形態的Rho蛋白及其相關信號分子的表達,檢測調控破骨細胞環狀封閉帶形成的cortactin、DC-STAMP及c-Src等信號蛋白的表達,檢測調控破骨細胞黏附結構形成的樁蛋白、粘著斑蛋白、整合素、動力素等信號蛋白的表達。揭示Rho蛋白及其信號分子對破骨細胞骨架形態的調控...
在本課題中,我們採用穩定高表達TMOD1的大鼠L6細胞株,套用免疫沉澱、免疫螢光、免疫印跡、RNAi技術等生物學手段,闡明TMOD1調節actin聚合影響胰島素信號轉導的分子機理,並評估下調該基因糾正肌肉細胞胰島素耐受的效果。本課題的開展為探索以胰島素抵抗為特徵的II型糖尿病的防治提供新靶點,具有重要的理論意義和套用價值。...
檢查 1.組織病理學檢查 病變腦組織可見海綿狀空泡,澱粉樣斑塊且形態多樣,神經細胞丟失伴膠質細胞增生,極少白細胞浸潤等炎症反應。2.免疫學檢查 多種免疫學方法,如免疫組織化學,免疫印跡,酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等,已用於檢測組織中的PrPsc,採用抗PrP27~30抗體,可在經異硫氰酸胍及壓熱處理或蛋白酶K消化...
第八章花粉過敏症與免疫 第一節血清和鼻分泌物中的IgE 第二節IgE與免疫治療 第三節免疫學檢測技術 一、放射過敏原吸附試驗(簡稱RAST)檢測IgE的方法 二、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測IgE的方法 三、帽狀過敏原檢測系統(CAPsystem)特異性免疫球蛋白(sIgE)的測定方法 四、免疫印跡法的套用 第九章花粉過敏症的臨床...
以大腸埃希菌BL21(DE3)(購自於優寶生物科技有限公司,貨號:ST1007)作為原核表達的宿主菌,構建BL21/pET-28a-rLaChIFNα重組菌,將質粒抽提送測序,將重組菌用IPTG誘導其表達長效雞干擾素α,經聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)及蛋白免疫印跡實驗(WesternBlot)鑑定後保存菌種。重組長效雞干擾素α經純化、除菌、...
用特異性抗體進行流式細胞儀及免疫螢光檢測,鑑定芽孢表面疫苗蛋白的表達,並使用SDS-DTT法提取芽孢外殼蛋白,進行免疫印跡鑑定。以飼料添加劑形式口服免疫麥穗魚,檢測魚血清中IgM濃度,並用肝吸蟲尾蚴攻擊,對芽孢疫苗進行評價。旨在以益生菌枯草芽孢桿菌為載體,構建能在芽孢表面表達重組蛋白的工程菌,研製具益生功能...
因此,我們推測在病理性神經痛的發生過程中,細胞骨架可能通過兩種途徑調控TRPV4通道的表達:①機械刺激信號作用於β-微管蛋白影響TRPV4通道表達;②微絲通過膜聯蛋白A2影響TRPV4通道表達。我們擬通過雷射共聚焦、RNA干擾、Real-time PCR、免疫印跡、膜片鉗及免疫共沉澱技術研究DRG持續受壓後TRPV4表達的調控機制,為臨床病...
5.影像學檢查 顳骨CT檢查可顯示前庭水管狹窄。特殊造影下的內耳膜迷路MRI可顯示部分患者內淋巴管變細。6.免疫學檢查 Raoch(1995)報告47%的梅尼埃病患者有HSP70抗體,雙側者為58.8%。Gottschlich(1995)套用蛋白質免疫印跡法檢測梅尼埃病患者血清對牛內耳抗原的抗體,顯示30%患者有68kD抗原抗體。鑑別診斷 耳源性眩暈...
檢查診斷 腦脊液檢查淋巴細胞增多,但在血液或腦脊液難以分離出HSV。診斷上,在症狀出現3d以上,可利用免疫印跡法檢測腦脊液的HSV-IgG抗體或作腦脊液的PCR檢測。治療方案 對於一般患者,以止痛、縮短病程和防止繼發感染為原則。(一)、止痛給予鎮痛劑,如阿司匹林、安乃近等,賽庚啶亦可減輕其疼痛,各種安定藥對後遺神經痛...
檢查方法 實驗室檢查:腦脊液檢查可發現蛋白濃度升高、白細胞增多、lgG水平增高。一些病毒抗體(如抗風疹病毒抗體、抗帶狀皰疹病毒抗體)的出現,支持此病的診斷。其他輔助檢查:1.磁共振檢查 磁共振檢查發現腦與脊髓的白質區有散在的脫髓鞘斑塊,3個病灶(至少有1個腦室周圍的病變)或3個以上病灶對診斷有重要價值,此種...
常見儀器有免疫層析分析儀、金標免疫層析分析儀、膠體金免疫層析試條檢測儀、金標斑點法定量讀數儀、心臟標誌物檢測儀、金標測試儀、早孕/排卵試紙閱讀儀等。5) 免疫印跡儀器 (管理類別:Ⅱ類)常見儀器有全自動蛋白印跡儀、全自動免疫印跡儀、胎兒纖維連線蛋白分析儀、過敏源IgE抗體檢測儀、全自動過敏原IgE抗體分析儀...
如血清支原體IgM抗體≥1:64,或恢復期抗體滴度有4倍增高,可進一步確診。直接檢測呼吸道標本中肺炎支原體抗原,可用於臨床早期快速診斷。單克隆抗體免疫印跡法、核酸雜交技術及PCR技術等具有高效、特異而敏感等優點。生殖支原體感染 臨床樣本生殖支原體檢測的首選方法是核酸擴增試驗。通過聚合酶鏈反應或核酸擴增試驗檢測到...
盧進, 周東東, 楊永清*, 尹磊淼*. 不同參數對蛋白免疫印跡法結果的影響. 生物技術 2019;29(4):283-8 周東東, 李聰聰, 龐雨, 尹磊淼*. 中醫臟腑觀的科學闡釋和價值. 中華中醫藥雜誌 2019;34(11):220-2 彭玲玲, 段婷婷, 陳艷焦, 王宇, 徐玉東, 楊永清*, 尹磊淼*. 細胞因子在重症哮喘發病機制中的研究...
用包被了BP抗原特定域(如BP180 的NC16A域和BP180或BP230的C末端)的重組蛋白行酶聯免疫吸附試驗(Enzyme-linked immunosorbent assays,ELISAs),已發現是檢測自身抗體相當特異(>90%)的方法。在未選擇的BP患者中進行這個試驗,其總體敏感性可能比得上以鹽裂皮膚為底物的間接IF。與免疫印跡相比,ELISA所測的抗原...