聚丙烯醯胺凝膠電泳[法](polyacrylamide gel electrophoresis)是1995年經全國科學技術名詞審定委員會審定發布的醫學名詞。
基本介紹
- 中文名:聚丙烯醯胺凝膠電泳[法]
- 外文名:polyacrylamide gel electrophoresis
- 所屬學科:醫學
- 發布時間:1995年
聚丙烯醯胺凝膠電泳[法](polyacrylamide gel electrophoresis)是1995年經全國科學技術名詞審定委員會審定發布的醫學名詞。
聚丙烯醯胺凝膠主要有兩種方式:一是用於分離和純化雙鏈DNA片段的非變性聚丙烯醯胺凝膠。在未變凝膠中分離DNA的缺點是DNA的遷移率受鹼基組成和序列的影響。由於無法得知未知DNA的遷移是否反常,故不能用未變性的聚丙烯醯胺凝膠電泳確定雙鏈DNA的大小。二是用於分離及純化單鏈DNA片段的變性聚丙烯醯胺凝膠。這類聚丙烯醯胺...
聚丙烯醯胺凝膠電泳[法]聚丙烯醯胺凝膠電泳[法](polyacrylamide gel electrophoresis)是1995年經全國科學技術名詞審定委員會審定發布的醫學名詞。發布時間 1995年經全國科學技術名詞審定委員會審定發布的醫學名詞。出處 《醫學名詞 第三分冊》
聚丙醯胺凝膠電泳屬於分子生物學,屬於中性電泳。電泳簡介 聚丙醯胺凝膠電泳 中性聚丙烯醯胺凝膠電泳 安裝電泳裝置和配製凝膠溶液 操作步驟 1.必要時可用KOH/甲醇清洗玻璃板和間隔片。2.用溫熱的去污劑溶液洗滌玻璃板和間隔片,再充分漂洗,先用自來水,再用去離子水。應拿取玻璃的邊緣部分或帶手套操作,以免手上的...
聚丙烯醯胺凝膠電泳技術是指聚丙烯醯胺凝膠由丙烯醯胺(簡稱Acr)和交聯劑N,N'一亞甲基雙丙烯醯胺(簡稱Bis)在催化劑過硫酸銨(APS),N,N,N',N' 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交聯形成的具有網狀立體結構的凝膠,並以此為支持物進行電泳。聚丙烯醯胺凝膠電泳技術可根據不同蛋白質分子所帶電荷...
丙烯醯胺凝膠電泳即聚丙烯醯胺凝膠電泳。聚丙烯醯胺凝膠是由單體丙烯醯胺(acrylamide,簡稱Acr)和交聯劑N,N-甲叉雙丙烯醯胺(N,N—methylene-bisacylamide,簡稱Bis)在加速劑N,N,N,N—四甲基乙二胺(N,N,N,N—tetramethyl ethylenedia mine,簡稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(ammonium persulfate (...
非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Native-PAGE)或稱為活性電泳是在不加入SDS 和巰基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質進行聚丙烯醯胺凝膠電泳,常用於酶的鑑定、同工酶分析和提純。未加SDS的天然聚丙烯醯胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離是依據其電泳遷移率的不同和凝膠的...
十二烷(基)硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳SDS polyacrylamide gel electrophoresis。簡介 在陰離子表面活性劑十二烷(基)硫酸鈉(SDS)存在下進行的一種聚丙烯醯胺凝膠電泳。由2-巰基乙醇等將S-S鍵切斷的蛋白質,在SDS溶液中,大多是1克約與1.4克的SDS結合,形成電荷密度大致一定的複合體。所以在凝膠中電泳的速度是...
變性聚丙烯醯胺凝膠法是分子生物學常用技術之一,凝膠的灌制比水平電泳槽凝膠灌制困難,漏膠和產生氣泡常在所難免,需經過反覆實踐才能掌握其灌制技巧。運用變性聚丙烯醯胺凝膠垂直電泳分離PCR產物條帶,硝酸銀染色顯示條帶進而篩選兩者間差異基因。聚丙烯醯胺為水溶性高分子聚合物,不溶於大多數有機溶劑,具有良好的絮凝...
定性聚丙烯醯胺凝膠電泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質進行聚丙烯醯胺凝膠電泳,常用於酶的鑑定、同工酶分析和提純。未加SDS的天然聚丙烯醯胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離是依據其電泳遷移率的不同和凝膠的分子篩作用。可以得到較高的解析度...
電泳 聚丙烯醯胺凝膠電泳;polyacrylamide gel electrophoresis;PAGE 用聚丙烯醯胺為支持基質的電泳程式。一般說來,實現聚丙烯醯胺凝膠電泳有兩種類型。⑴單向電泳:採用完整的蛋白質或用十二烷基硫酸鈉(SDS)處理的蛋白質的單向泳動,在有凝膠的平板上平行分離(過去也有用在玻管中的圓筒形棒狀凝膠進行電泳的,現已很少有...
(4) 染色與脫色 取下凝膠板,用甲苯胺藍溶液染色,用水洗去多餘的染色液至背景無色為止。聚丙烯醯胺凝膠電泳法 操作法 (1)制膠 取溶液A2ml,溶液B5.4ml,加脲2.9g使溶解,再加水4ml,混勻,抽氣趕去溶液中氣泡,加0.56%過硫酸銨溶液2ml,混勻製成膠液,立即用裝有長針頭的注射器或細滴管將膠液沿管壁...
電泳是分離混合物中離子成分的最有效方法之一。以聚丙烯醯胺凝膠作支持物的電泳稱為聚丙烯醯胺凝膠電泳。聚丙烯醯胺凝膠電泳用於分離蛋白質和寡核苷酸。其套用可以分為兩大類,一類是屬於可以直接在凝膠上觀察計算;另一類需要洗脫回收膠中特定的蛋白和核酸。尿聚丙烯醯胺凝膠電泳實質是尿蛋白電泳,是將尿蛋白按其分子量...
《聚丙烯醯胺凝膠電泳》是1975年 科學出版社出版的圖書,作者是莽克強。圖書簡介 本書介紹了聚丙烯醯胺凝膠電泳技術在分離、分析和製備蛋白質、核糖核酸等生物大分子方面的基本原理和具體操作。套用部分著重介紹了蛋白質、核糖核酸的分子量測定及該技術近年來在病毒學研究工作中的一些套用。本書可供臨床化學、食品化學、...
凝膠電泳被廣泛用於分子生物學、遺傳學和生物化學:1.大的DNA或者RNA分子通常利用瓊脂糖凝膠電泳(agarose gel electrophoresis)分離,也可以使用聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)。2.蛋白質的凝膠電泳通常在加入十二烷基硫酸鈉的聚丙烯醯胺凝膠中進行(SDS-PAGE),或者非變性凝膠電泳,或二維電泳。 SDS-PAGE 蛋白質凝膠電泳圖...
聚丙烯醯胺凝膠電泳 1.原理 聚丙烯醯胺凝膠通過丙烯醯胺單體、鏈聚合催化劑N,N,N’,N’-四甲基乙二胺(TEMED)和過硫酸銨以及交聯劑N,N’-亞甲雙丙烯醯胺之間的化學反應而形成。丙烯醯胺單體在催化劑作用下產生聚合反應形成長鏈,長鏈經交聯劑作用交叉連線形成凝膠,其孔徑由鏈長和交聯度決定。鏈長取決於丙烯...
因此這種膠束在SDS-PAGE中的電泳遷移率不受蛋白質原有電荷的影響,而主要取決於蛋白質或亞基的大小。分離膠的染色 二維聚丙烯醯胺凝膠電泳分離後的蛋白質點經顯色後才能被鑑定。二維聚丙烯醯胺凝膠電泳中的顯色是一個重要的步驟,常用的非放射性染色方法中最靈敏的為銀染法,其靈敏度可達到l ng甚罕更低;其次是...
瓊脂糖或聚丙烯醯胺凝膠電泳是分離鑑定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度離心法)所無法分離的DNA片段。當用低濃度的螢光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外,還可以從電泳後的...
凝膠可用:聚丙烯醯胺凝膠、瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠等。技術特點 ①解析度高,可將等電點相差0.01~0.02 pH單位的蛋白質分開;②靈敏度高,可以分離濃度很低的樣品,且重複性好;③隨電泳時間的延長,區帶越來越窄;④樣品混合液可以加在電泳系統的任何部位,通過等電聚焦作用,各組分均能聚焦到各自等電點的pH...
聚丙烯醯胺凝膠上的核酸樣品,經啡啶溴紅染色,在紫外光照射下,發出的螢光很弱,所以濃度很低的核酸樣品不能用此法檢測出來。可以引起核酸變性的因素很多,如加熱、極端的pH、有機溶劑、醯胺、尿素等。由溫度升高而引起的變性稱熱變性。由酸鹼度改變引起的變性稱酸鹼變性。尿素是用聚丙烯醯胺凝膠電泳法測定DNA序列...
我們在用mRNA差異顯示技術篩選成人難治性腎病與激素敏感性腎病綜合徵患者間差異基因的實驗中,運用變性聚丙烯醯胺凝膠垂直電泳分離PCR產物條帶,硝酸銀染色顯示條帶進而篩選兩者間差異基因。詳細介紹 聚丙烯醯胺外觀:固體聚丙烯醯胺為白色或微黃色顆粒或粉末,分子量在400-2000萬之間,固體產品外觀為白色或略帶黃色粉末,...
用放射性同位素標記待檢測的片段(即探針DNA),然後與細胞提取物共溫育,形成DNA-蛋白複合物,將該複合物加到非變性聚丙烯醯胺凝膠中進行電泳。定義 電泳遷移率變動分析,又稱凝膠阻滯實驗,英文名electrophoretic mobility shift assay,簡稱EMSA。是體外利用電泳遷移率的變化來分析DNA與蛋白質相互作用的一種特殊的凝膠...
乳與乳製品中β-乳球蛋白的測定聚丙烯醯胺凝膠電泳法 《乳與乳製品中β-乳球蛋白的測定聚丙烯醯胺凝膠電泳法》是2008年8月10日實施的一項行業標準。備案信息 備案號:77276-2020 備案月報: 2020年第10號(總第246號)
尿蛋白電泳常用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳法(SDS-PAGE),亦稱蛋白SDS盤狀電泳。簡介 SDS-PAGE是目前分析蛋白質亞基組成和測定其相對分子質量的最好方法。參考值 各相對分子質量的尿蛋白均顯示微量蛋白區帶,但以清蛋白區帶為主。臨床意義 尿蛋白電泳主要用於蛋白尿的分型:低相對分子質量蛋白尿、中及高相對...
近幾年來,電泳已成為各類化學分析和製備的基本技術之一,廣泛套用於生物化學、藥物化學、臨床診斷、無機化學等領域。它與層析和超離心一起被稱為三大分離技術。具體的電泳法很多,依據不同的標準可分成不同的類型。如按照使用的載體,可分為自由電泳法、濾紙電泳法、瓊脂糖電泳法、聚丙烯醯胺凝膠電泳法、醋酸纖維素...
非還原性聚丙烯醯胺凝膠電泳 不含巰基乙醇或二硫蘇糖醇(DTT)等還原劑的聚丙烯醯胺凝膠電泳。在這種電泳中蛋白質的二硫鍵不會被還原打開,與還原性聚丙烯醯胺凝膠電泳的結果對比,可以分析蛋白質單體間借二硫鍵形成多聚體的情況。
Western印跡法是將獲得的蛋白質樣品通過SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳,對不同分子量的蛋白質進行分離,然後通過轉移電泳將凝膠上分離到的蛋白質轉印到固相支持物上。簡介 蛋白質經單向電泳後分離後被轉移到硝酸纖維濾膜上,然後用放射性或酶標記的特異抗體來檢測相應抗原的存在。蛋白質印跡技術是1975年Southern建立了Southern...
電洗脫法是將在某些支持物中含有的目的成分電泳遷移出來的技術。如瓊脂糖、聚丙烯醯胺凝膠電泳後,將含有所分離成分的凝膠切出來,放在適當的電場中,使凝膠內所要的成分移到緩衝液中。洗脫也可以分為兩種:一種是選擇與配體有親和力的物質進行洗脫,另一種是選擇與待分離物質有親和力的物質進行洗脫。用染料作為配體...
(2)把上述已分離的蛋白(在聚丙烯醯胺凝膠中)發刀下來填補在瓊脂凝膠板的孔中,用雙擴散試驗法分析其中的特異性抗原;(3)像免疫電泳那樣直接在玻片上作瓊脂免疫等電聚焦。這一方法主要用於鑑定抗原。以免疫電泳優越之處在於能在選定的PH範圍內完成蛋白(抗原)的分離,並提高了分辨力。解釋 等電點聚焦就是在...
一、電泳:在克隆基因表達產物的檢測分析過程中,電泳是常用的方法,但在純化蛋白時,通常都不採用電泳的方法。由於某些特殊的目的,需要用聚丙烯醯胺凝膠電泳純化蛋白質,常用下述方法進行:①從電泳後的凝膠上切下所需的相應條帶,將凝膠壓碎,用緩衝液浸泡,使其中的蛋白質擴散出來,從而獲得純化的蛋白質。此法簡單...