《聚丙烯醯胺凝膠電泳》是1975年科學出版社出版的圖書,作者是莽克強。
基本介紹
- 中文名:聚丙烯醯胺凝膠電泳
- 作者:莽克強
- 出版社:科學出版社
- 出版時間:1975年8月
- ISBN:13031314
圖書簡介
圖書目錄
- 目錄
- 第一章 引言
- 第二章 基本原理
- 第三章 具體操作
- 第四章 聚丙烯醯胺凝膠電泳在研究病毒蛋白質和核酸方面的套用
《聚丙烯醯胺凝膠電泳》是1975年科學出版社出版的圖書,作者是莽克強。
聚丙烯醯胺凝膠電泳( polyacrylamide gel electrophoresis,簡稱PAGE),是以聚丙烯醯胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術,用於分離蛋白質和寡核苷酸。聚丙烯醯胺凝膠由單體丙烯醯胺和甲叉雙...
聚丙醯胺凝膠電泳屬於分子生物學,屬於中性電泳。電泳簡介 聚丙醯胺凝膠電泳 中性聚丙烯醯胺凝膠電泳 安裝電泳裝置和配製凝膠溶液 操作步驟 1.必要時可用KOH/甲醇清洗玻璃板和間隔片。2.用溫熱的去污劑溶液洗滌玻璃板和間隔片,再充分漂洗,先用自來水,再用去離子水。應拿取玻璃的邊緣部分或帶手套操作,以免手上的...
聚丙烯醯胺凝膠主要有兩種方式:一是用於分離和純化雙鏈DNA片段的非變性聚丙烯醯胺凝膠。在未變凝膠中分離DNA的缺點是DNA的遷移率受鹼基組成和序列的影響。由於無法得知未知DNA的遷移是否反常,故不能用未變性的聚丙烯醯胺凝膠電泳確定雙鏈DNA的大小。二是用於分離及純化單鏈DNA片段的變性聚丙烯醯胺凝膠。這類聚丙烯醯胺...
聚丙烯醯胺凝膠電泳技術是指聚丙烯醯胺凝膠由丙烯醯胺(簡稱Acr)和交聯劑N,N'一亞甲基雙丙烯醯胺(簡稱Bis)在催化劑過硫酸銨(APS),N,N,N',N' 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交聯形成的具有網狀立體結構的凝膠,並以此為支持物進行電泳。聚丙烯醯胺凝膠電泳技術可根據不同蛋白質分子所帶電荷...
丙烯醯胺凝膠電泳即聚丙烯醯胺凝膠電泳。聚丙烯醯胺凝膠是由單體丙烯醯胺(acrylamide,簡稱Acr)和交聯劑N,N-甲叉雙丙烯醯胺(N,N—methylene-bisacylamide,簡稱Bis)在加速劑N,N,N,N—四甲基乙二胺(N,N,N,N—tetramethyl ethylenedia mine,簡稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(ammonium persulfate (...
非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Native-PAGE)或稱為活性電泳是在不加入SDS 和巰基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質進行聚丙烯醯胺凝膠電泳,常用於酶的鑑定、同工酶分析和提純。實驗原理 非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Native-PAGE)或稱為活性電泳是在不加入SDS 和巰基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質進行...
十二烷(基)硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳SDS polyacrylamide gel electrophoresis。簡介 在陰離子表面活性劑十二烷(基)硫酸鈉(SDS)存在下進行的一種聚丙烯醯胺凝膠電泳。由2-巰基乙醇等將S-S鍵切斷的蛋白質,在SDS溶液中,大多是1克約與1.4克的SDS結合,形成電荷密度大致一定的複合體。所以在凝膠中電泳的速度是...
聚丙烯醯胺凝膠電泳可根據電泳樣品的電荷、分子大小及形狀的差別達到分離目的,兼具分子篩和靜電效應,分辨力高於瓊脂糖凝膠電泳。可分離只相差1個核苷酸的DNA片段。聚丙烯醯胺凝膠電泳用於分析和製備長度小於1kb的DNA片段。根據所要分離的核酸片段大小,可製備不同濃度的凝膠。2.凝膠的製備和電泳 由於氧能抑制丙烯醯胺的...
凝膠電泳被廣泛用於分子生物學、遺傳學和生物化學:1.大的DNA或者RNA分子通常利用瓊脂糖凝膠電泳(agarose gel electrophoresis)分離,也可以使用聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)。2.蛋白質的凝膠電泳通常在加入十二烷基硫酸鈉的聚丙烯醯胺凝膠中進行(SDS-PAGE),或者非變性凝膠電泳,或二維電泳。 SDS-PAGE 蛋白質凝膠電泳圖...
定性聚丙烯醯胺凝膠電泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質進行聚丙烯醯胺凝膠電泳,常用於酶的鑑定、同工酶分析和提純。未加SDS的天然聚丙烯醯胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離是依據其電泳遷移率的不同和凝膠的分子篩作用。可以得到較高的解析度...
二維聚丙烯醯胺凝膠電泳是結合了等電聚焦技術(根據蛋白質等電點進行分離)以及SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳技術(根據蛋白質的大小進行分離)的電泳技術。簡介 二維聚丙烯醯胺凝膠電泳(2D―PAGE)形成的二維電泳是分離分析蛋白質最有效的一種電泳手段。原理 蛋白質的分離 通常第一維電泳是等電聚焦,在細管中(φ1~3 mm...
聚丙烯醯胺凝膠電泳用於分離蛋白質和寡核苷酸。其套用可以分為兩大類,一類是屬於可以直接在凝膠上觀察計算;另一類需要洗脫回收膠中特定的蛋白和核酸。尿聚丙烯醯胺凝膠電泳實質是尿蛋白電泳,是將尿蛋白按其分子量大小、順序分為不同組分,套用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳的一種試驗。尿蛋白的形成主要是通過腎...
電泳 聚丙烯醯胺凝膠電泳;polyacrylamide gel electrophoresis;PAGE 用聚丙烯醯胺為支持基質的電泳程式。一般說來,實現聚丙烯醯胺凝膠電泳有兩種類型。⑴單向電泳:採用完整的蛋白質或用十二烷基硫酸鈉(SDS)處理的蛋白質的單向泳動,在有凝膠的平板上平行分離(過去也有用在玻管中的圓筒形棒狀凝膠進行電泳的,現已很少有...
變性聚丙烯醯胺凝膠法是分子生物學常用技術之一,凝膠的灌制比水平電泳槽凝膠灌制困難,漏膠和產生氣泡常在所難免,需經過反覆實踐才能掌握其灌制技巧。運用變性聚丙烯醯胺凝膠垂直電泳分離PCR產物條帶,硝酸銀染色顯示條帶進而篩選兩者間差異基因。聚丙烯醯胺為水溶性高分子聚合物,不溶於大多數有機溶劑,具有良好的絮凝...
《聚丙烯醯胺凝膠電泳》是1975年 科學出版社出版的圖書,作者是莽克強。圖書簡介 本書介紹了聚丙烯醯胺凝膠電泳技術在分離、分析和製備蛋白質、核糖核酸等生物大分子方面的基本原理和具體操作。套用部分著重介紹了蛋白質、核糖核酸的分子量測定及該技術近年來在病毒學研究工作中的一些套用。本書可供臨床化學、食品化學、...
尿蛋白圓盤電泳又稱為SDS一聚丙烯醯胺凝膠電泳。臨床意義 區別尿蛋白的分子量,從而了解尿蛋白的形成原因和病變部位。中分子和大分子的尿蛋白主要由腎小球損傷所致;小分子量尿蛋白為腎小管及其間質病變導致,混合性蛋白尿病變累及腎小管、腎小球和間質。要求 尿蛋白定性在一個加號以上才可以測定。意義 ( l )正常...
凝膠電泳 瓊脂糖是從海藻中提取出來的一種多聚多糖,是由D-半乳糖和L-半乳糖以α-1,3和β-1,4糖苷鍵相連形成的線狀高聚物。瓊脂糖遇冷水膨脹,溶於熱水成溶膠,冷卻後成為孔徑範圍從50nm到大於200nm的凝膠。瓊脂糖或聚丙烯醯胺凝膠電泳是分離鑑定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速,可以分辨用其它...
我們在用mRNA差異顯示技術篩選成人難治性腎病與激素敏感性腎病綜合徵患者間差異基因的實驗中,運用變性聚丙烯醯胺凝膠垂直電泳分離PCR產物條帶,硝酸銀染色顯示條帶進而篩選兩者間差異基因。詳細介紹 聚丙烯醯胺外觀:固體聚丙烯醯胺為白色或微黃色顆粒或粉末,分子量在400-2000萬之間,固體產品外觀為白色或略帶黃色粉末,...
密度梯度電泳優點是可供更清晰的譜帶適於純度分析。簡介 如果合成的聚丙烯醯胺凝膠從上至下是一個正的線性梯度凝膠,點在凝膠頂部的樣品在電場中向著凝膠濃度逐漸增高的方向即孔徑逐漸減小的方向遷移。隨著電泳的繼續進行,蛋白質受到孔徑的阻力越來越大。電泳開始時,樣品在凝膠中的遷移速率主要受兩個因素的影響:一是...
聚丙烯醯胺凝膠電泳[法]聚丙烯醯胺凝膠電泳[法](polyacrylamide gel electrophoresis)是1995年經全國科學技術名詞審定委員會審定發布的醫學名詞。發布時間 1995年經全國科學技術名詞審定委員會審定發布的醫學名詞。出處 《醫學名詞 第三分冊》
(4) 染色與脫色 取下凝膠板,用甲苯胺藍溶液染色,用水洗去多餘的染色液至背景無色為止。聚丙烯醯胺凝膠電泳法 操作法 (1)制膠 取溶液A2ml,溶液B5.4ml,加脲2.9g使溶解,再加水4ml,混勻,抽氣趕去溶液中氣泡,加0.56%過硫酸銨溶液2ml,混勻製成膠液,立即用裝有長針頭的注射器或細滴管將膠液沿管壁...
(二)聚丙烯醯胺凝膠電泳 以聚丙烯醯胺作支持物。常用垂直板電泳。單體丙烯醯胺在加入交聯劑後,就成聚丙烯醯胺。由於這種凝膠的孔徑比瓊脂糖凝膠的要小,所以可用於分析分子量小於1000bp的DNA片段。聚丙烯醯胺中一般不含有RNase,所以可用於RNA的分析。但仍要留心緩衝液及其他器皿中所帶的RNase。聚丙烯醯胺凝膠上的核酸...
雙鏈DNA分子在一般的聚丙烯醯胺凝膠電泳時,其遷移行為決定於其分子大小和電荷。不同長度的DNA片段能夠被區分開,但同樣長度的DNA片段在膠中的遷移行為一樣,因此不能被區分。DGGE/TGGE技術在一般的聚丙烯醯胺凝膠基礎上,加入了變性劑(尿素和甲醯胺)梯度,從而能夠把同樣長度但序列不同的DNA片段區分開來。一個特定...
非還原性聚丙烯醯胺凝膠電泳 不含巰基乙醇或二硫蘇糖醇(DTT)等還原劑的聚丙烯醯胺凝膠電泳。在這種電泳中蛋白質的二硫鍵不會被還原打開,與還原性聚丙烯醯胺凝膠電泳的結果對比,可以分析蛋白質單體間借二硫鍵形成多聚體的情況。
非變性凝膠電泳 非變性凝膠電泳(nondenaturing gel electrophoresis,native gel electrophoresis)是2008年公布的生物化學與分子生物學名詞。定義 不含變性劑,以聚丙烯醯胺、瓊脂糖等凝膠為分離介質的電泳。出處 《生物化學與分子生物學名詞》。
凝膠可用:聚丙烯醯胺凝膠、瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠等。技術特點 ①解析度高,可將等電點相差0.01~0.02 pH單位的蛋白質分開;②靈敏度高,可以分離濃度很低的樣品,且重複性好;③隨電泳時間的延長,區帶越來越窄;④樣品混合液可以加在電泳系統的任何部位,通過等電聚焦作用,各組分均能聚焦到各自等電點的pH...
這種變性的單鏈DNA的遷 移率幾乎與其鹼基組成及序列完全無關, 可以保證DNA分子電泳譜帶的單-性。 (王保捷)基本原理 雙鏈DNA分子在一般的聚丙烯醯胺凝膠電泳時,其遷移行為決定於其分子大小和電荷。不同長度的DNA片段能夠被區分開,但同樣長度的DNA片段在膠中的遷移行為一樣,因此不能被區分。DGGE/TGGE技術在一般...
濃縮膠是在不連續聚丙烯 醯胺凝膠電泳中,同一介質的凝膠濃度分為 兩種,負極的加樣側一般濃度為2%〜5%, 稱為濃縮膠,其餘部分濃度為6%〜8%, 稱為分離膠。由於濃縮膠濃度低、孔徑大, 而分離膠濃度高、孔徑小。帶電荷的蛋白質 或核酸離子在大孔徑膠中移動時阻力小,移動速度快,當接近小孔徑的分離膠時,...
又稱免疫電聚焦。是電泳分析方法之一。實際上它是免疫擴散電泳和等電聚焦技術相聯合的一種電泳分析方法。性質 具體操作大致有三種情況。(1)圓盤免疫等電聚焦是用聚丙烯醯胺凝膠柱先行等電聚焦,把微克量樣品(如混合蛋白質)分開之後,把這凝膠柱條再包埋在具有緩衝體系的瓊脂凝膠中,各蛋白隨即擴散到瓊脂膠內,並...
分離膠指不連續緩衝體系聚丙烯醯胺凝膠電泳中的一部分,其組成、緩衝液pH和凝膠孔徑與濃縮膠均不 同,具有分子篩效應的小孔徑凝膠。蛋白質 或核酸在電泳過程中由濃縮膠進入分離膠, 由於分子篩作用,小分子的物質容易通過, 阻力小,遷移速度快;大分子的則受到較大 的阻力而被滯後。因此即使淨電荷相似、泳 動率...