電泳遷移率變動分析

用放射性同位素標記待檢測的片段（即探針DNA），然後與細胞提取物共溫育，形成DNA-蛋白複合物，將該複合物加到非變性聚丙烯醯胺凝膠中進行電泳。

基本介紹

• 中文名：電泳遷移率變動分析
• 外文名：electrophoretic mobility shift assay
• 類型：分析方法
• 別名：凝膠阻滯實驗
• 實驗方法：用32P標記DNA分子

定義

電泳遷移率變動分析，又稱凝膠阻滯實驗，英文名electrophoretic mobility shift assay，簡稱EMSA。是體外利用電泳遷移率的變化來分析DNA與蛋白質相互作用的一種特殊的凝膠電泳技術。

實驗方法

通常用32P標記DNA分子，而不標記蛋白質。電泳結束後，用放射自顯影技術顯現具放射性標記的DNA條帶位置。如果細胞蛋白提取物中不存在與同放射性標記的DNA探針結合的蛋白質，那么所有放射性標記都將出現在凝膠的底部；反之，將會形成DNA-蛋白質複合物，由於受到凝膠阻滯的緣故，放射性標記的DNA條帶就會出現在凝膠的不同部位。

套用

1. 用於研究特定的轉錄因子以及轉錄因子所結合的順勢作用元件。
2. 用於研究與蛋白質相結合的DNA的序列的特異性。
3. 評估突變對探針DNA與結合蛋白相互作用的影響。
4. 用於研究DNA-foot printing。