直接篩選

直接篩選即用基因組DNA直接從cDNA文庫中篩選位於該基因組片段內的cDNA,如從覆蓋有候選區域的YAC、PAC、BAC克隆中分離外源片段作為探針從文庫中篩選候選基因;而cDNA選擇法恰恰與直接篩選法相反,它把基因組DNA固定在膜上,用總cDNA與之雜交,通過PCR從中回收可與基因組片段結合的cDNA片段。

基本介紹

  • 中文名:直接篩選
  • 含義:用基因組DNA直接從cDNA文庫中篩選位於該基因組片段內的cDNA
缺點是大片段地純化,標記較困難,而PAC、BAC克隆片段純化相對方便的優點就成為這種方法發展的趨勢;同時由於探針的複雜性,使雜交背景加深,假陽性增多,而且容易忽略短的外顯子或低豐度cDNA。cDNA選擇法的最大優越性在於PCR反應的介入,大大提高了選擇的靈敏度,可以檢測到一些稀有轉錄子。

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