片段印跡技術是指利用目標物質的一個結構片段作為替代模板合成的分子印跡聚合物,而合成的聚合物對該目標物質及其類似物質均具有識別性能的技術。是分子印跡技術的分支。片段印跡技術是指利用目標物質的一個結構片段作為替代模板合成的分...
印跡技術是指將待測核酸分子結合到一定固相支持物上的方法。southern印跡,將電泳分離的DNA片段轉移到一定的固相支持物上的過程。作品概念 印跡技術是指將待測核酸分子結合到一定固相支持物上的方法。southern印跡,將電泳分離的DNA片段轉移到一定的固相支持物上的過程。製作過程 DNA分子被限制酶切,經瓊脂糖凝膠電泳,...
印跡雜交,是基因診斷技術的一種,有多種方式,第一種是Northern印跡雜交,是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉印到硝酸纖維素膜上的方法。第二種是Southern印跡雜交,是由凝膠電離經限制性內切酶消化的DNA片段。第三種是Western印跡雜交,是將蛋白樣本通過聚丙烯醯胺電泳按分子量大小分離,再轉移到雜交膜(blot)上,然後通過...
Southern印跡雜交(Southern blot)是1975年由英國人southern創建,是研究DNA圖譜的基本技術,在遺傳病診斷、DNA圖譜分析及PCR產物分析等方面有重要價值。基本概念 Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按鹼基互補的原則特異性地雜交形成雙...
RNA印跡技術是在進樣前用甲基氧化汞、乙二醛或甲醛使RNA變性,而不用NaOH,因為它會水解RNA的2’-羥基基團。RNA變性後有利於在轉印過程中與硝酸纖維素膜結合,它同樣可在高鹽中進行轉印,但在烘烤前與膜結合得並不牢固,所以在轉印後不能用低鹽緩衝液洗膜,否則RNA會被洗脫。在膠中不能加EB,因它為影響RNA與...
這一極為靈敏和有效的核酸雜交技術是以它的發明人索森(E.M.Southern)的姓命名的。簡介 高分子量DNA用限制性內切酶消化後,經瓊脂糖凝膠電泳,使不同大小的DNA片段分離,並直接在膠上變性,然後利用毛細作用(現常用電轉移技術),將它們轉移到硝酸纖維膜或尼龍纖維膜上,這一過程稱為吸印。膜上的DNA被固定後與...
“諾森”印跡(法)與IINA斑跡法過程類似的技術 方法原理 門錯森”印跡(法】又稱RNA印跡(法)。用於從凝膠中轉移出RNA片段轉移至硝酸纖維素膜,尼龍膜等,並用探針進行雜交(稱“北方”雜交)以顯示目的區段的位置。顯示RNA的大小及豐度。
Northern印跡雜交(Northern blot)。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術由Southern於1975年創建,稱為Southern印跡技術,RNA印跡技術正好與DNA相對應,故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質印跡技術則被稱為Western blot。簡介 Northern印跡雜交的RNA吸印與Southern印跡雜交的...
技術套用 1)生物學方面的套用 分子印跡技術所使用的生物大分子,最早就是一些蛋白質。例如:牛血色素、牛血清蛋白、肌酸激酶、溶解酵素等。Ogiso等製備了針對特異性DNA片段的分子印跡聚合物凝膠,實現了對單個鹼基突變進行識別與分離。Liu等人採用一步表面引發原位聚合,合成了生物兼容性好、穩定性好、特異性強的螢光...
1.核酸分子雜交技術 套用該技術可對特定DNA或RNA序列進行定性或定量檢測,包括Southern印跡雜交、Northern印跡雜交、點雜交、原位雜交等。(1)Southern印跡雜交:Southern印跡雜交是一種利用硝酸纖維素膜或尼龍膜吸附DNA的功能進行雜交的技術。其基本方法是:先用限制性內切酶消化待測DNA片段,然後用瓊脂糖凝膠電泳分離酶...
實現分子印跡技術均相識別DNA的電化學生物分子識別技術;(4)研究了以DNA超級鏈結構、雙功能化金屬複合納米顆粒和HRP/SiO2納米顆粒的信號放大策略實現均相DNA雜交電化學信號放大,使DNA檢測靈敏度明顯提高;(5)研究了利用電化學掃描顯微鏡構建 DNA 晶片陣列 SECM 電化學檢測,首次實現了9種DNA片段的同時電化學檢測。
三、印跡技術 實驗十 Southern blot 實驗十一 Northern blot 實驗十二 Western blot 下篇 綜合性實驗 一、HBV-DNA的分子生物學檢測 實驗十三 病毒載量測定(實時螢光定量PCR)實驗十四 HBV基因型分析(限制性片段長度多態性RFLP)實驗十五 HBV-DNA的耐藥株檢測(線性探針反向雜交INNO-LIPA)二、基因點突變的分子生物學...
凝膠中DNA片段的相對位置轉移到濾膜的過程中繼續保持著。附著在濾膜上的DNA與32P標記的探針雜交,利用放射自顯影術確定探針互補的每條DNA帶的位置,從而可以確定在眾多酶解產物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。(4)Northern印跡雜交 (Northern blotting)DNA印跡技術由Southern於1975年創建,稱為Southern印跡技術...
拷貝數變異檢測是一種通過對特定基因或全基因組掃描發現基因組中大片段DNA序列的變異的檢測方法。拷貝數變異包括染色體水平的缺失、倒位、易位、插入、重複等基因組結構的變化。拷貝數變異檢測方法 1.基於聚合酶鏈反應的方法 包括定時定量聚合酶鏈反應、多重連結探針擴增技術、多重可擴增探針雜交技術等。2.基於雜交...
由於這一技術已擴展至免疫反應、受體結合等非核酸領域,出現了蛋白質晶片、免疫晶片、細胞晶片、組織晶片等,所以改稱生物晶片技術更符合發展趨勢。基本流程 大部分分子診斷實驗室的核心技術都主要集中在檢測特異性、相對較短的DNA或RNA片段上。該技術能診斷傳染性疾病、鑑別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測與疾病有關...
(2)螢光原位雜交技術檢查 對於疑為FMR-Ⅰ基因大片段缺失的病例可作FISH檢測,以螢光標記的探針,對經過秋水仙素等處理,處於中期分裂象的細胞染色體進行原位雜交,正常染色體有螢光顯示,而相應部位有缺失的染色體則無螢光顯示。2.基因檢測 (1)DNA印跡技術 動態突變和大片段的缺失突變會造成FMR-Ⅰ基因片段長度的...
套用於免疫印跡技術 免疫印跡技術(immunoblotting,IBT)也稱為免疫轉印技術,其原理是根據各種抗原分子量大小不同,在電泳中行走的速度不同,因而在硝酸纖維素膜上占據的位置也不同;把含有特異性抗體的血清和這一薄膜反應,那么特異性的抗原抗體反應就顯色。而納米金免疫印跡技術相比酶標記免疫印跡技術具有簡單、快速、...