《活化的小膠質細胞在糖尿病性視網膜病變中的作用機制》是依託復旦大學，由鄔海翔擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：活化的小膠質細胞在糖尿病性視網膜病變中的作用機制
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：鄔海翔
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
糖尿病性視網膜病變（diabetic retinopathy, DR）是嚴重的致盲性眼病，我國DR患者呈大幅增加之勢。研究顯示在DR早期，小膠質細胞的數量增加、活動力增強、形態也發生改變。本項目擬對活化的小膠質細胞在糖尿病性視網膜病變的發病機制中的作用進行研究。擬完成：1. 建立視網膜小膠質細胞活化模型，用細胞增殖試劑WST-1分析LPS處理後小膠質細胞的增殖情況，並用ELISA法檢測LPS活化的小膠質細胞TNF-α的表達；2. 活化的小膠質細胞對視網膜微血管細胞凋亡和氧化應激的作用機制；3.取 STZ誘導的糖尿病大鼠眼球製作病理切片，觀察小膠質細胞活化情況。通過上述研究，以期闡明活化的小膠質細胞在糖尿病性視網膜病變發病機制中的作用。
結題摘要
小膠質細胞作為視網膜重要的免疫監視細胞，在糖尿病視網膜病變中發生活化，並通過釋放TNF-α，IL-1β等多種炎症因子以及細胞遷移，啟動多種視網膜神經元細胞的損傷，破壞血－視網膜屏障，增加活性氧簇生成，從而進一步促進氧化應激損傷。眼病理研究發現，不同分期的DR病變中，均可見活化的小膠質細胞聚集在微血管瘤、視網膜新生血管等病變周圍，小膠質細胞的作用尚不清。在該項目中，我們用脂多糖建立小膠質細胞體外激活模型，並將激活的小膠質細胞和視網膜微血管周細胞以及臍靜脈內皮細胞在Transwell系統中進行共培養。分別檢測周細胞氧化應激和細胞凋亡以及內皮細胞的血管生成相關因子釋放情況。我們的結果顯示脂多糖能夠在體外建立穩定的小膠質細胞激活模型，表現為其形態的變化，炎症因子如腫瘤壞死因子、白介素1β分泌的顯著增加，以及小膠質細胞表型的變化。共培養體系中，活化的小膠質細胞顯著上調微血管周細胞NADPH氧化酶亞基的表達，並顯著抑制解偶聯蛋白－2的表達。與對照組相比，活化的小膠質細胞共培養組，微血管周細胞活性氧簇產量增加20%，並可以被NADPH酶抑制劑DPI，抗氧化劑輔酶Q10和活性氧簇清除劑N-乙醯半胱氨酸NAC所抑制。與對照組相比，活化的小膠質細胞共培養組周細胞線粒體膜電位（ΔΨm）下降9.50%， NF-κB-p65的核轉位以及Caspase-3的激活顯著增加，活化的小膠質細胞對微血管周細胞的以上作用可被DPI抑制。共培養體系中，活化的小膠質細胞顯著提高VEGF， PDGF的生成，和VEGFR-2的表達，下調VEGFR-1和PDGFR的表達。活化的小膠質細胞還顯著增加內皮細胞的增殖活性，並轉變內皮細胞的表型。我們的研究表明，激活的小膠質細胞可通過促進微血管周細胞活性氧簇的產生增加，促進微血管周細胞凋亡，並可以調節血管內皮細胞的血管生成相關因子的表達，以及其增殖活性和表型。這對進一步了解糖尿病性視網膜病變中，小膠質細胞活化與微血管改變的相關性提供了一些基礎。
