《新型多價口服HPV預防性疫苗的研製》是依託西安交通大學，由楊筱鳳擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型多價口服HPV預防性疫苗的研製
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊筱鳳
- 依託單位：西安交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
預防性HPV疫苗的上市使人們看到了子宮頸癌一級預防的希望，但昂貴的價格妨礙了其在開發中國家推廣，加之現有疫苗覆蓋病毒譜的不適應性，HPV 疫苗本土化顯得更為迫切。本計畫在以往研究的基礎上，以我國流行高危HPV病毒毒株HPV16，58，兼顧其他如HPV18及低危HPV6，11型為對象，以減毒志賀桿菌為載體，構建多價口服HPV預防性疫苗。本研究擬對前期構建的載體sf301 △virGDsbA33G進行最佳化改進，進一步缺失突變毒力基因set 、sen，以及免疫抑制相關基因 ospF，並表達黏膜免疫佐劑- - 大腸桿菌熱不穩定腸毒素B亞單位LT-B，增強疫苗的黏膜免疫反應，達到單次免疫獲得有效保護性免疫的目的。利用經直腸豚鼠痢疾模型,最佳化多價疫苗免疫方案,探索製備價格低廉、可有效激發黏膜免疫反應、安全無毒, 預防高危HPV型別的感染,符合我國國情的HPV預防性疫苗，對宮頸癌進行一級預防。
結題摘要
大量研究證實高危型HPV生殖道感染是婦女子宮頸癌發生的啟動因子，因此預防HPV發生成為消滅子宮頸癌發生的有效手段。2005年人類歷史上首例腫瘤疫苗HPV VLP疫苗的成功上市，是人類抗爭癌症戰鬥中的里程碑，它標誌著通過疫苗接種消滅癌症的開始和預示了光明的前景。但是VLP昂貴的費用阻礙了疫苗在貧困地區的推廣，而這些地區聚集了80%的宮頸癌病患。我們致力於研發適合開發中國家的經濟、有效的口服疫苗，不僅保證疫苗接種的良好依從性，而且根據黏膜免疫的共同效應，經過腸道黏膜途徑免疫後，在陰道黏膜局部獲得有效的黏膜保護。本研究在DNA和蛋白水平上通過多種方式驗證，利用無縫連線和自殺載體介導的同源重組技術，成功地將志賀菌中的icsA基因中主要毒性功能區以in-frame和out-frame兩種模式替換為密碼子最佳化的HPV16 L1基因。結果表明無論是在培養基中還是在侵入細胞後，在in-frame結構中，L1可被呈現至細菌表面；而在out-frame結構中，L1獨立表達於胞質中，可以組裝成為VLP結構。在in-frame結構中敲除icsP基因可以將L1蛋白以未切割形式局限在細菌表面，為病毒抗原呈現提供了一種新的可能性。動物實驗結果顯示，各菌株毒性得到了很大程度地削弱，並顯示出良好的免疫原性。受免疫豚鼠體內可檢測出特異性的抗HPV16 L1 VLP中和抗體，提示產生可能的免疫保護力，其中以獨立表達於胞漿的out-frame結構免疫效果最佳。
