《整合素β1介導PRL-3促腫瘤轉移的分子機制研究》是依託北京大學，由壽成超擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：整合素β1介導PRL-3促腫瘤轉移的分子機制研究
- 項目負責人：壽成超
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
已有較多研究表明，酪氨酸磷酸酶PRL-3可促進多種腫瘤的侵襲和遷移，並與腫瘤分期和病人預後密切相關，但相關分子機制不清。我們在前期研究中發現，PRL-3能與整合素α1相結合、並能與整合素β1形成複合物及下調β1的酪氨酸磷酸化水平；PRL-3主要依賴於整合素β1通過活化MAPK通路發揮其促腫瘤轉移作用。本項目擬在上述工作基礎上，圍繞 ① PRL-3與整合素β1的相互作用是否由整合素α1或其它分子所介導？② PRL-3的磷酸酶活性、亞細胞定位變化對細胞的侵襲和轉移、對整合素β1的磷酸化水平及ERK1/2活化有何影響？③ PRL-3導致整合素β1的酪氨酸磷酸化水平降低是由PRL-3直接作用所致還是通過其它磷酸酶發揮作用三方面問題開展研究，以期認識整合素β1介導PRL-3促腫瘤轉移的分子機制，這對全面了解PRL-3在腫瘤發生髮展中的作用與機制，對開發新的抗腫瘤靶標藥物，均具重要意義。
結題摘要
前期研究表明， PRL-3 能夠與integrinα1相互作用，並可通過integrinβ1介導的 ERK1/2 信號通路促進細胞的遷移、侵襲及轉移，但PRL-3是否能直接與integrinβ1相互作用，PRL-3的酪氨酸磷酸酶活性對integrinβ1的酪氨酸磷酸化影響及由此引起的生物學功能變化均不明確。本課題的研究中，通過基因干擾、免疫共沉澱和雷射共聚焦觀察等不同方法，發現PRL-3可以直接與integrinβ1相互作用，integrinα1抑制integrinβ1與PRL-3的結合。高表達PRL-3可引起integrinβ1酪氨酸磷酸化水平降低，體外磷酸化實驗也進一步證明了integrinβ1是PRL-3磷酸酶作用的底物。通過特異的針對integrinβ1 783 和795位點酪氨酸磷酸化的抗體檢測發現，PRL-3可以降低integrinβ1 783位點酪氨酸磷酸化水平，但是沒有檢測到795位點的磷酸化水平變化。干擾PRL-3或使用PRL-3抑制劑能提高integrinβ1 783位點磷酸化，但干擾integrinα1會降低integrinβ1 783位點磷酸化。本研究首次鑑定出PRL-3的酪氨酸磷酸酶底物，並揭示了integrinα1在其中的調節作用。 在完成《任務書》規定的工作之外，為探討針對PRL-3的基因免疫是否具有抑制腫瘤生長的作用，我們採用慢病毒轉導體系，以小鼠D2F2乳腺癌建立了穩定高表達PRL-3的D2F2/PRL-3細胞核對照D2F2/NC細胞，並以pVAX1-Igk-PRL-3（K-P3）為基因疫苗去免疫鼠。預防免疫實驗中，我們發現基因槍免疫的K-P3較pVAX1具有明顯的抑制D2F2/PRL-3生長的作用並可增加動物生存期，但K-P3對D2F2/NC生長無抑制作用。上述效應與PRL-3靶向的細胞毒淋巴細胞（CTL）和Th1型免疫反應。治療免疫實驗中，K-P3同樣具有抑制腫瘤生長作用。針對PRL-3的蛋白免疫無論是在預防免疫還是治療免疫中，均未觀察到明顯的抑制腫瘤生長作用。本研究對於發展以PRL-3為靶點的新型抗腫瘤治療方案具有參考價值。此外，我們發現PRL-3促進腫瘤細胞對化療藥物的耐受，並調節部分miRNA的表達。上述研究擴展了對PRL-3的認識。
