噬菌體T7是一種烈性的、具有不能收縮的短尾的多面體噬菌體,病毒粒子含線狀、雙鏈、末端過剩的DNA,與λ噬菌體不同,DNA不具單鏈的末端區。宿主為大腸埃希氏菌(F'scherichiq cdi )。如同其它有尾噬菌體.噬菌體T7的吸附點也是在...
III類基因最後表達,其中包括噬菌體顆粒蛋白的基因和參與DNA成熟和包裝功能的基因。編碼序列在T7噬菌體DNA中有效包裝,50個基因都能被表達。編碼序列之間的間隔一般小於100bp,間隔區通常含有一個或多個啟動子、轉錄終止位點、RnaseIII切割...
他先後分離了fd噬菌體、T7噬菌體的A2及A3啟動子、h噬σ菌體的PR啟動子及大腸桿菌乳糖操縱子的UV5啟動子等5段被酶保護的區域,並進行了序列分析,以後又有人做了50多個啟動子的序列分析後發現,在被保護區內有一個由5個核苷酸組成...
以當今大腸桿菌表達系統主流的T7啟動子為例:T7啟動子(T7 promoter),是來自於T7噬菌體的能夠對T7 RNA聚合酶有特異性反應的強啟動子,是啟動T7噬菌體基因 轉錄的一段序列。T7 RNA聚合酶能選擇性的激活T7噬菌體啟動子的轉錄,...
T7RNA聚合酶(英語:T7 RNA Polymerase)是一種RNA聚合酶,分子量約99kDa。專門催化5'→3'方向的RNA形成過程。T7RNA聚合酶具有高度啟動子專一性,且只會轉錄T7噬菌體中位於T7啟動子下游的的DNA或DNA複製品。此酶在合成RNA的過程...
該複製子能使低拷貝數的質粒在大腸桿菌中得到複製;一個可誘導強複製子(Pl裂解性複製子).該複製子能夠被用於增加質粒的拷貝數;還有一個選擇性標記sacB,該標記含有一個克隆位點(BamHI).位點兩端分別是噬菌體SP6和T7的啟動子 ...
2. 以T7啟動子作為體外轉錄啟動子,在啟動子後面靶位序列連續帶有3個G,轉錄效率最 高;3. 在正向引物5/端添加一個帽子G,有利於提高體外轉錄RNA分子的侵染活性。操作步驟 編輯 1. 提取cDNA質粒;...
該菌株用於高效表達克隆於含有噬菌體T7啟動子的表達載體(如pET系列)的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位於λ 噬菌體DE3區,該區整合於BL21的染色體上。該菌適合表達非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)。
該菌株用於高效表達克隆於含有噬菌體T7啟動子的表達載體(如pET系列)的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位於λ 噬菌體DE3區,該區整合於BL21的染色體上。該菌適合表達非毒性蛋白。基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)。BL...
該菌株用於高效表達克隆於含有噬菌體T7啟動子的表達載體(如pET系列)的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位於λ噬菌體DE3區,該區整合於BL21的染色體上。該菌適合表達非毒性蛋白。基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)3:...
許多載體如pBluescript, pGEM等均帶有來自噬菌體SP6或E.coli噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴於DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應體系中若加入經標記的NTP,則可合成RNA探針。RNA探針一般都是...
Sp6、T7是來源於噬菌體的啟動子,用於插入片段末端測序。P1人工染色體載體(PAC)結合了P1載體和BAC載體的最佳特性,包括陽性選擇標記sacB及噬菌體P1的質粒複製子和裂解性複製子。然而除了將連線產物包裝進λ噬菌體顆粒以及在cre—loxP位點...
一、 P1噬菌體的分子遺傳特徵 二、 P1噬菌體載體 三、 P1人工染色體載體 思考題 主要參考文獻 第五章 表達載體 第一節 大腸桿菌表達載體 一、 大腸桿菌表達載體的結構 二、 利用T7噬菌體啟動子的表達載體 ...
原核表達系統中通常使用的可調控的啟動子有Lac(乳糖啟動子)、Trp(色氨酸啟動子)、Tac(乳糖和色氨酸的雜合啟動子) 、lPL (l噬菌體的左向啟動子)、T7噬菌體啟動子等。SD序列 1974年Shine和Dalgarno首先發現,在mRNA上有核糖體的結合...