特殊感受態

相對於正常的TOP10感受態而言 JM109,DH5a,BL21(DE3) 菌株,BL21(DE3) pLysS等這些類別的感受態細胞,都是特殊感受態。

基本介紹

  • 中文名:特殊感受態
  • 性質:感受態
  • 屬性:特殊
  • DH5a是一種:常用於質粒克隆的菌株
特點和作用
這些特殊感受態的一些特點和作用:
DH5a是一種常用於質粒克隆的菌株E.coliDH5a在使用pUC系列質粒載體轉化時,可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現α-互補。可用於藍白斑篩選鑑別重組菌株。
基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1。
BL21(DE3) 菌株
該菌株用於高效表達克隆於含有噬菌體T7啟動子表達載體(如pET系列)的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位於λ 噬菌體DE3區,該區整合於BL21的染色體上。該菌適合表達非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)。
BL21(DE3) pLysS菌株
該菌株含有質粒pLysS,因此具有氯黴素抗性。PLysS含有表達T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達水平,但不干擾目的蛋白的表達。該菌適合表達毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr
4:JM109菌株
該菌株在使用pUC系列質粒載體進行DNA轉化或用M13 phage載體進行轉染時,由於載體DNA產生的LacZa多肽和JM09編碼的LacZΔM15進行α-互補,從而顯示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鑑別重組體菌株
基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]。
HB101菌株
該菌株遺傳性能穩定,使用方便,適用於各種基因重組實驗
基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1
大多數大腸桿菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,後者在CCA/TGC序列的第一個胞嘧啶C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都會產生dam,dcm,從而受到甲基化的影響.
部分限制性內切酶對甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的內切酶說明中均有說明。
大多數酶切位點的甲基化不影響切割,而有些會影響,如XbaI, BclI等。而且甲基化只發生在特定序列,以XbaI為例,只有在位點序列旁出現GA或TC,該XbaI位才會被甲基化。Xl1-Blue菌株 特點:具有卡那抗性、四環素抗性和氯黴素抗性。
用途:分子克隆和質粒提取。
基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。

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