加德納菌

加德納菌

加德納菌性陰道炎又名嗜血桿菌性陰道炎,以前曾歸於棒桿菌性陰道炎,是由加德納桿菌引起的一種陰道黏膜炎症,可通過性交傳染。故列為性傳播疾病。

基本介紹

介紹,培養特性與生化特性,症狀,檢驗方法,材料和方法,討論,一般治療,

介紹

大量研究表明:在性關係混亂的人群中,加德納菌性陰道炎有高流行率。與患者發生性關係的男性伴侶中,90%的尿道中可發現此菌。加德納桿菌為革蘭氏陰性細小桿菌,常呈球桿狀,有時呈絲狀和多形狀,常見兩極染色。寬0.4--0.6微米,長1--2微米大小,無活動力、無鞭毛、無芽孢。許多菌株有莢膜。在人工培養時必須給予新鮮血液才能生長繁殖,故有“嗜血”之稱。但其生物特性與嗜血桿菌不盡相同,臨床上引起的陰道炎為非特異性陰道炎

培養特性與生化特性

營養要求較高,在普通瓊脂平板上不生長。多數為兼性厭氧,接種在含5%人血瓊脂平板上,3%~5%二氧化碳,35~37℃培養24h,形成針尖大小菌落;48h後菌落直徑0.4~0.5mm,呈圓形,不透明,光滑。在人血和兔血瓊脂培養基上形成β-溶血環。甲哨唑(50μg/片)抑菌試驗陽性。
陰道加德納菌觸酶陰性,大多數菌株分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖產酸,不發酵甘露醇、棉籽糖和肌醇,賴氨酸、鳥氨酸和精氨酸脫羧酶陰性,V-P、靛基質、明膠液化、硝酸鹽還原和硫化氫均陰性。水解馬尿酸鈉。

症狀

加德納桿菌引起的感染多數較輕,多見於性活躍婦女。急性期白帶增多,有魚腥或氨的臭味,外陰潮濕不適,常伴有陰道灼熱感、性交痛及外陰騷癢。檢查見部分患者外陰紅腫,陰道黏膜充血,呈灰紅色,輕度紅腫,分泌物多呈均質性,稀薄,灰白色,有時為乳黃色或類綠色,腥臭味。陰道pH常為5--5.5。有時白帶量少,僅有薄薄一層,如膜樣覆蓋在充血的陰道壁上。少數患者陰道壁有紅斑或淤點,孕婦患者可引起流產或產後子宮內膜炎。感染重者也可導致敗血症尿道感染腎周膿腫膀胱炎等。
根據臨床表現,陰道分泌物塗片或培養確診。尤其能查到特徵性線索細胞,診斷不難。
鑑別診斷應包括所有的淋菌性、真菌性、滴蟲性陰道炎

檢驗方法

材料和方法

1、臨床標本:宮頸分泌物,取自醫院門診婦產科就診的非特異性陰道炎(NSV)患者,常規消毒用無菌棉簽自宮頸口取分泌物於無菌生理鹽水管中。
2、革蘭染色法:取無菌生理鹽水中的宮頸或陰道分泌物直接塗片,常規革蘭染色,找到線索細胞者為陽性。
3、吖啶橙染色螢光法:取無菌生理鹽水中的宮頸或陰道分泌物直接塗片,自然乾燥,火焰固定,0.1 mmol/L吖啶橙染色37℃30 min,用0.01 mol/L PBS沖洗2次,0.01 mmol/L 氯化鈣分色1 min,用0.01 mol/L PBS緩衝液沖洗1次,甘油封片,螢光顯微鏡觀察結果。在上皮細胞中發現成堆桔黃色細小桿菌為陽性。
4、分離培養鑑定法:將無菌生理鹽水中的陰道或宮頸分泌物,以無菌手續接種於陰道加德納菌專用分離培養基上,置5%二氧化碳培養箱37℃孵育48 h,挑取灰色、半透明、光滑、露滴狀樣菌落,如為革蘭染色陰性小桿菌者,進行生化鑑定,生化鑑定標準按文獻進行鑑定。
5、PCR檢測法:(1)根據Belkum等報導加德納菌位於IIS-23srRNA基因區為特異性引物序列,擴增片段:433bp。引物15′-TTTCGTGGAGGGTTCGATTCTGG-3′引物2 5′-TACA-AGCTGATAGGACGCG-3′由上海生物工程公司合成。(2)臨床標本模板DNA的製備:將宮頸分泌物500μl生理鹽水中,12 000 r/min離心10 min,棄上清液,加鹼性裂解液,98℃10 min,12 000 r/min離心5 min,取上清液做模板。(3)PCR擴增和產物檢測:反應總體積為25μl,包括10×PCR緩衝液2.5 μl,4×dNTP 1.5 μl,引物1,2各0.25 μl,無菌去離子水9.5μl,模板10 μl,Taq DNA聚合酶1 U/μl,以無菌石蠟油30 μl覆蓋,進入PCR循環,循環參數為:95℃5 min,94℃ 1 min,58℃ 1 min,72℃ 1 min,32個循環,最後72℃延伸5 min。取擴增產物15 μl,於2%瓊脂糖(含EB液)上100 V電泳30 min,於紫外光下觀察結果,出現433 bp擴增帶者為陽性,未見433 bp擴增帶為陰性。

討論

1、革蘭染色線索細胞仍是一種診斷細菌性陰道病的常規方法。
異染性染料吖啶橙以插入方式與病原體雙螺旋DNA分子結合,根據病原體DNA或RNA對吖啶橙染料的吸附方式不同所放射的螢光也不同,再加上加德納菌在侵襲的靶目標為上皮細胞聚集,當吖啶橙染色後在螢光照射下,發射出桔紅色螢光,能清晰地檢測出加德納菌在上皮細胞上的聚集現象,作出精確的診斷。
3、分離培養鑑定法是國際確認的金指標,臨床上由於不正規的套用抗生素,導致許多病原體在一定程度上受到抑制,給分離培養帶來困難,造成分離培養陰性結果,建議做分離培養應取材於治療前的標本,需要專用的高營養的培養基,以提高分離培養的陽性檢出率。
4、PCR技術具有高度的特異性和敏感性,選用特異的寡核苷酸引物序列,檢測目的是病原體的遺傳物質DNA不受抗生素治療等藥物治療的影響,對徹底根治病原體有著極其重要的意義。

一般治療

1)磺胺類藥物和四環素族藥物
四環素100毫克和磺胺噻唑0.5克製成栓劑,置入陰道深部,每晚一次,共10日。
2)滅滴靈
每次250毫克,1日3次,共7日。或大劑量2克,一次口服。大劑量可能引起噁心、嘔吐。
3)氨苄青黴素
口服500毫克,一天4次,共7日。有全身感染者,可靜脈滴注氨苄青黴素氯黴素
4)治療期間禁止性生活
因為男性伴侶常是無症狀帶菌者,其尿培養陽性率高達79.91%,治療期間禁止性生活。

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