基本介紹
- 中文名：免疫組織化學法
- 外文名：immunohistochemistry
- 類別：組織化學法
- 方式：標記抗體與特異性抗原反應顯色
免疫組織化學法概述,幾種常用免疫組織化學方法的原理,免疫螢光方法,免疫酶標方法,免疫膠體金技術,
免疫組織化學法概述
免疫組織化學又稱免疫細胞化學，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來，藉助顯微鏡(包括螢光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(如蛋白質、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。
免疫組織化學的全過程包括：1.抗原的提取與純化；2.免疫動物或細胞融合，製備特異性抗體以及抗體的純化；3.將顯色劑與抗體結合形成標記抗體；4.標本的製備；5.免疫細胞化學反應以及呈色反應；6.觀察結果。
幾種常用免疫組織化學方法的原理
免疫螢光方法
是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理，先將已知抗體標上螢光素，以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原，在螢光顯微鏡下觀察。當抗原抗體複合物中的螢光素受激發光的照射後即會發出一定波長的螢光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進而還可進行定量分析。由於免疫螢光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便，所以在臨床病理診斷、檢驗中套用比較廣。
免疫酶標方法
免疫酶標方法是繼免疫螢光後，於60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用，然後加入酶的底物，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是目前最常用的技術。本方法與免疫螢光技術相比的主要優點是：定位準確，對比度好，染色標本可長期保存，適合於光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發展非常迅速，已經衍生出了多種標記方法，且隨著方法的不斷改進和創新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來越方便。目前在病理診斷中廣為使用的當屬PAP法、ABC法、SP法等。
