基本介紹
- 中文名：化學免疫學
- 外文名：immunochemistry
- 結構：抗體
- 各種：抗原的化學分析
定義,免疫細胞化學,發展,
定義
【作者單位】：中國醫學科學院中國協和醫科大學腫瘤醫院
【分類號】：R446.6
【DOI】：cnki:ISSN:1672-1535.0.2004-03-021
免疫組織化學簡稱免疫組化,是套用免疫學及組織化學原理,對組織切片或細胞標本中的某些化學成分,進行原位的定性、定位或定量的研究。這種技術稱為免疫組織化學技術。免疫組化是利用抗體與抗原的結合具有高度特異性的特點,採用已知的抗體檢測組織或細胞的抗原物質,以期確定組織或細胞是否存在未知抗原,並進行定性、定位或定量的研究。抗體與抗原結合後形成的免疫複合物是無色的,故必須藉助組織化學方法,將抗體抗原反應部位顯示出來。已知,組織或細胞凡是含有諸如蛋白質,多膚,多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸、胺基酸及病原體等抗原物…
免疫細胞化學
（immunocytochemistry）
是將免疫學基本原理與細胞化學技術相結合所建立起來的新技術，根據抗原與抗體特異性結合的特點，檢測細胞內某種多肽、蛋白質及膜表面抗原和受體等大分子物質的存在與分布。肽類與蛋白質種類繁多，均具有抗原性，當將人或動物的某種肽或蛋白質作為抗原注入另一種動物體內，則產生與該抗原相應的特異性抗體（免疫球蛋白）；將抗體從血清中提出後，結合上某種標記物，即成為標記抗體。用標記抗體與組織切片標本孵育，抗體則與細胞中相應抗原發生特異性結合，結合部位被標記物顯示，則在顯微鏡下觀察到該肽或蛋白質的分布。用螢光素（常用異硫氰酸）標記抗體，並於螢光顯微鏡下觀察，稱免疫螢光術。如抗體與辣根過氧化物酶（horseradishperoxidase，HRP）等結合，進行酶顯示後，可在光鏡或電鏡觀察，用於電鏡者則稱為免疫電鏡術（immunoelectronmicroscopy)此外，以鐵蛋 標記抗體白標記抗體，稱鐵蛋白標記法,也能用於電鏡下觀察。
標記抗體與抗原結合方式主要有兩種：①直接法：用標記抗體與抗體中的相應抗原直接結合，操作方法簡便，特異性高，但敏感性較差，此法可用於檢定未知抗原；②間接法：先用未標記的具有特異性的第一抗體與樣品中的相應抗原結合，然後再以標記的第二抗體與特異性的第一抗體結合；第二抗體是用第一抗體作為抗原注入另一動物體內誘導產生的抗體，然後再結合以標記物。通過這樣的放大作用，使抗原分子上的標記物大大增多，故間接法較直接法的敏感性大為增高，約高5～10倍，故套用更為廣泛。間接法中較常用的，如過氧化物酶-抗過氧化物酶複合物法(peroxidaseanti-peroxidasecomplexmethod， 標記方法PAP法)，該法除需一抗和二抗外，還需要製備HRP標記的抗酶抗體,即以HRP作為抗原免疫動物，製成抗HRP抗體，再以HRP對標記該抗體，製成穩定的環形PAP複合物。標本先後經一抗、二抗和PAP複合物處理後再以DAB顯色抗原存在部位可見棕黃色產物。
發展
免疫細胞學技術有了很大進展，各種新方法相繼建立。單克隆抗體（monoclonalantibody）製備技術極大地提高抗體的特異性與免疫組化染色的精確性。繼PAP法之後由於生物素-親合素等試劑的套用，為檢測微量抗原、受體、抗體提供了更精確的技術。常用的生物素-親合方法有:標記親合素-生物素法(labelledavidin-biotinmethodLAB法)、橋連親合素-生物素法（bridgedavidin-biotinmethod,BAB法)及親素-生物素-過氧化物酶複合物法(avidin-biotin-peroxidasecomplexmethod，ABC法)；現市上有配製成的ABC藥盒供應，使用簡便，是廣泛套用的一種方法。
