免疫螢光技術

免疫螢光技術

免疫螢光技術是將免疫學方法(抗原抗體特異結合)與螢光標記技術結合起來研究特異蛋白抗原在細胞內分布的方法。由於螢光素所發的螢光可在螢光顯微鏡下檢出,從而可對抗原進行細胞定位。

基本介紹

  • 中文名:免疫螢光技術
  • 外文名:immunofluorescence
  • 原理:抗原抗體反應
  • 技術:直接法、夾心法、間接法和補體法
概念,技術原理,使用方法,

概念

將免疫學方法(抗原抗體特異結合)與螢光標記技術結合起來研究特異蛋白抗原在細胞內分布的方法。由於螢光素所發的螢光可在螢光顯微鏡下檢出,從而可對抗原進行細胞定位。

技術原理

免疫螢光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上螢光素製成螢光標記物,再用這種螢光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體複合物上含有螢光素,利用螢光顯微鏡觀察標本,螢光素受激發光的照射而發出明亮的螢光(黃綠色或桔紅色),可以看見螢光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量技術測定含量。

使用方法

用螢光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱螢光抗體法;用已知的螢光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱螢光抗原法。這兩種方法總稱免疫螢光技術,以螢光抗體方法較常用。用免疫螢光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫螢光細胞(或組織)化學技術。
免疫螢光細胞化學分直接法、夾心法、間接法和補體法。

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