精子免疫螢光技術，免疫標記技術之一 。可用以研究抗精子抗體。
基本介紹
- 中文名：精子免疫螢光技術
- 用以：研究抗精子抗體
- 包括：三個基本步驟
- 操作方法：用10ml生理鹽水洗滌2次
精子免疫螢光技術
診法。免疫標記技術之一 。可用以研究抗精子抗體。包括三個基本步驟：空氣乾燥後用甲醇固定的精子塗片作為抗原 底物；塗片暴露於待測血清(宮頸黏液、精漿)中；然後接觸螢光標記的免疫球蛋白，即可在螢光顯微鏡下觀察到抗原抗體反應。操作方法：取供精者精液0?2ml，用10ml生理鹽水洗滌2次，680g離心5分鐘。將洗過的精子懸浮在鹽水中，調至10×106精子/ml。取1滴精子懸浮液做塗片，電扇下吹30分鐘，使之乾燥後放入100%甲醇中30分鐘以固定乾燥的精子。再將其置入磷酸緩衝鹽水中(PBS，pH7?2)。晾乾塗片後， 加1滴待測血清，將其放在潮濕盒子內，室溫下置1小時，然後用PBS將血清衝去，再洗2次，隔10分鐘換1次PBS。亦可將塗片與異硫氰酸螢光素(FITC)結合之抗血清孵育30分鐘，經多次沖洗，最後浸泡在含10%甘油的磷酸緩衝液中。螢光顯微鏡下觀察，在未稀釋的血清中常見不明原因的微弱染色，故滴度大於1∶16時方為陽性結果。
