《miRNAs在小鼠卵泡發育中的作用及其分子機制研究》是依託上海交通大學，由孫斐擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miRNAs在小鼠卵泡發育中的作用及其分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：孫斐
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
卵泡發育是原始卵泡啟動生長並經初級卵泡、次級卵泡、腔前卵泡、有腔卵泡而發育成成熟卵泡的過程。卵泡發生異常是導致不育不孕、自發流產等的主要原因。近年的研究表明microRNA(miRNA)以轉錄後調控方式參與雌性生殖過程的調節，且具有細胞和發育階段的特異性，但眾多的與卵泡發育相關的miRNAs及其作用的信號通路尚需闡明。本項目通過miRNA microarray篩選小鼠卵泡發育不同階段的顆粒細胞中差異表達的miRNAs，通過體外和體內實驗研究miRNA如何通過其靶基因發揮對卵泡發育過程中的顆粒細胞增殖和分化、卵母細胞成熟等的調控作用；同時，通過luciferase assay和染色質免疫共沉澱技術，尋找調控miRNA表達的相關轉錄因子，並在體內驗證這種調控作用和功能，以闡明miRNA調控卵泡發育的信號通路。研究miRNA調控卵泡發育的分子機制，將為探討女性不育的發病原因提供新的線索和切入點。
結題摘要
卵泡發育是原始卵泡啟動生長並經初級卵泡、次級卵泡、腔前卵泡、有腔卵泡而發育成成熟卵泡的過程。卵泡發生異常是導致不育不孕、自發流產等的主要原因。近年的研究表明 microRNA(miRNA)以轉錄後調控方式參與雌性生殖過程的調節，且具有細胞和發育階段的特異性，但眾多的與卵泡發育相關的 miRNAs 及其作用的信號通路尚需闡明。本項目通過 miRNA microarray 篩選小鼠卵泡發育不同階段的顆粒細胞中差異表達的 miRNAs，通過體外和體內實驗研究 miRNA 如何通過其靶基因發揮對卵泡發育過程中的顆粒細胞增殖和分化、卵母細胞成熟等的調控作用；同時，通過 luciferase assay 和染色質免疫共沉澱技術，尋找調控 miRNA 表達的相關轉錄因子，並在體內驗證這種調控作用和功能，以闡明 miRNA 調控卵泡發育的信號通路。通過對篩選出的差異表達顯著的miRNA研究發現，miR-224通過靶向PTX3影響小鼠COCs擴展和排卵；且p53和p65協同參與TGF-β1對腔前顆粒細胞中miR-224轉錄調控。發現miR-383的產生受到SF-1的正調控，進而通過降低RBMS1和c-Myc蛋白水平來促進E2的生成；且miR-383可以和miR-320一道，在卵泡發育過程中通過調控E2F1和SF-1來影響顆粒細胞增殖和類固醇激素生成。此外，TrkA通過IL6影響EGF誘導的COCs擴展；且TrkA-ERK1/2信號通路被NGF激活後通過降調ESR2抑制CDKN1A的表達，促進mGCs的增殖。這說明miRNAs可以和轉錄因子相互作用，共同調節卵泡的發育。因此，研究 miRNA 調控卵泡發育的分子機制，將為探討女性不育的發病原因提供新的線索和切入點。本項目發表6篇SCI收錄的論文。
