《炎性相關miRNAs在TNF介導的急性肝衰竭中調控機制的研究》是依託上海交通大學，由謝青擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：炎性相關miRNAs在TNF介導的急性肝衰竭中調控機制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：謝青
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
急性肝衰竭發生髮展過程中，最核心的關鍵事件是TNF介導的肝細胞凋亡和壞死，miRNAs作為一種新型免疫調節分子參與並調節天然免疫反應，調控以TNF為代表的炎性細胞因子的表達，提示miRNAs在肝衰竭的免疫發病機制中必將發揮重要的作用。本課題擬建立急性肝衰竭小鼠模型，運用miRNA晶片，Northern-blot及RT-PCR等技術了解急性肝衰竭肝組織miRNAs的表達譜，找出差異表達miRNAs並進行驗證，篩選出與肝衰竭發生和發展過程中密切相關的關鍵miRNAs，探討這些miRNAs在急性肝衰竭免疫發病機制中的作用和地位；並在體內外導入miRNAs 模擬物及阻抑物以改變其表達，研究miRNAs對肝衰竭肝細胞損傷過程中TNF 產生信號通路中關鍵分子的調控以及對肝細胞損傷和疾病轉歸的影響，並找到可能的靶基因，為急性肝衰竭新的免疫發病機制的闡明以及尋找治療新靶點提供實驗依據。
結題摘要
microRNAs在體內較多生理過程中發揮一定作用，如細胞再生、細胞分化以及內環境穩定。microRNAs在穩定肝細胞功能和肝細胞再生中也起到一定作用，如Cheung 等人[1]報導miR-122在非酒精性脂肪肝中的研究。TNF-α在急性肝衰竭中的作用已有較多研究，但是miRNAs在TNF-α介導急性肝衰竭發生機制中的作用還不是很清楚。本研究先從小鼠急性肝衰竭動物模型入手，通過免疫組化及ELISA方法發現小鼠肝臟組織學及血清學細胞因子的變化。然後通過miRNAs 晶片技術檢測肝臟組織中 miRNAs 的表達譜，找出差異性表達的炎症相關的miRNAs並進一步驗證。並通過生物信息學預測miR-15b、miR-16和miR-21共同作用於BCL2，miR-155 作用於caspase-12。並在體外通過LPS誘導Raw264.7細胞以進一步研究miR-155的來源，並利用miRNA模擬物（ miR-155 mimic）或阻遏物（miR-155 inhibitor）轉染小鼠胚胎肝細胞BNLCL2細胞研究miR-155對TNF-a表達的影響。通過我們的研究發現miRNAs（miR-15b、miR-16及miR-155 等）在TNF-α介導急性肝衰竭發生中發揮重要作用，相關miRNAs可以調控TNF介導肝細胞凋亡和壞死，從而導致肝衰竭的形成，這些研究結果可以為進一步了解肝衰竭的發病機制以及研發肝衰竭臨床干預措施提供了豐富的實驗依據。
