《山羊卵泡選擇中miRNAs的參與及其調控機制研究》是依託西南大學，由娜日蘇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：山羊卵泡選擇中miRNAs的參與及其調控機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：娜日蘇
- 依託單位：西南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
卵泡選擇（follicle selection）是決定排卵數量的重要步驟，屬於多因素參與調節的複雜生命過程，其機制尚未明確。探索miRNAs參與卵泡選擇調控的分子機制是對卵泡選擇調控機理的有益補充和完善，也對山羊排卵機理研究及卵泡儲備資源開發具有重要的意義。本項目以山羊卵泡為研究材料，利用山羊卵巢表達的miRNAs（前期基礎）制定miRNA晶片尋找募集卵泡、優勢卵泡及從屬卵泡中差異表達的miRNAs，通過生物信息學手段預測miRNA的靶基因，進一步利用螢光素酶報告系統明確miRNA與靶基因的調控關係；在此基礎上，利用FSH誘導顆粒細胞增殖研究FSH與miRNAs的調控關係,利用miRNA抑制劑（和類似物）體內外干擾途徑研究miRNA及其靶基因調控顆粒細胞增殖、激素合成及對卵泡發育波動力學的影響，闡明miRNAs參與卵泡選擇的調控機制。
結題摘要
優勢卵泡選擇是決定排卵數量的重要步驟，屬於多因素參與調控的複雜生命過程，其機制尚未明確。探索 miRNAs 參與優勢卵泡選擇調控的分子機制是對卵泡發育與選擇調控機制的有益補充和完善，也對山羊排卵機理研究及卵泡儲備資源開發具有重要的意義。本項目的研究結果如下：（1）將卵泡期山羊卵泡按直徑大小分組，通過小 RNA 測序從優勢卵泡組和從屬卵泡組中初步篩選出了 chi-miR-582-5p 等 9 個差異極顯著的 miRNAs（p小於0.01）；另外有 novel-344 等 4 個 miRNAs 在不同大小卵泡中呈現共同差異表達；（2）對小 RNA 測序的同批次卵泡樣品進行 mRNA 轉錄本測序，分析轉錄本與miRNA 預測靶基因的匯交信息。在優勢卵泡組和從屬卵泡組間差異極顯著的 chi-miR-130b-5p 及 chi-miR-214-3p 的預測靶基因富集在 Ovarian Steroidogenesis 通路中，其中 GDF9 轉錄本與 chi-miR-214-3p 的表達模式是相反的，qPCR 結果也驗證了這一點。在大小卵泡中共同差異表達的 novel-344 與其預測靶基因 FSHR 轉錄本的表達模式也是相反的；（3）在大小卵泡中差異表達的 chi-miR-449a-5p 與 VEGF 基因有靶向結合位點。用 VEGF、activin A 和 VEGF+activin A 處理體外培養的初級卵泡時顯著提高卵泡生長率（p小於0.05）。本研究中篩選出的 miRNAs 可能參與卵泡的發育、優勢卵泡的選擇等生命過程需要後續研究中進一步研究。
