T細胞自噬在口腔扁平苔蘚中的作用及其調控機制的研究

《T細胞自噬在口腔扁平苔蘚中的作用及其調控機制的研究》是依託武漢大學，由周剛擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：T細胞自噬在口腔扁平苔蘚中的作用及其調控機制的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：周剛
• 依託單位：武漢大學

項目摘要

自噬對MHC抗原的提呈、T細胞的免疫應答、細胞因子的分泌及角質形成細胞的炎症反應具有重要的調控作用。在原有研究基礎上，本課題提出口腔扁平苔蘚（OLP）中T細胞自噬的異常表達影響其活化、分化、增殖、凋亡等過程，導致T細胞的功能異常及角質形成細胞生物學特性的改變，從而影響了OLP的發生髮展的新假設。（1）檢測OLP T細胞自噬相關基因的差異表達譜，在mRNA和蛋白水平上進行驗證，分析其臨床意義。（2）建立OLP T細胞自噬模型。(3) 沉默自噬模型中T細胞上的差異自噬相關基因，觀察OLP T細胞的生物學特性和功能。（4）建立細胞互動作用立體模型，研究自噬在OLP T細胞和角質形成細胞互動對話中的作用。（5）探討OLP T細胞自噬的調節通路。（6）在轉錄後水平上分析自噬相關性miRNA對OLP T細胞自噬的調節機制。本課題對揭示OLP的免疫發病機制、探索診治新思路，具有重要的理論意義和套用價值。

結題摘要

口腔扁平苔蘚（oral lichen planus, OLP）是一種常見的由T細胞介導的免疫炎性疾病。細胞自噬作為重要的溶酶體降解通路，可影響T細胞增殖、活化、死亡及T細胞介導的免疫應答。本項目旨在研究T細胞自噬在OLP中的作用及調控機制。 主要研究內容包括（1）通過Autophagy Array檢測OLP患者外周血T細胞中差異表達的自噬相關基因，並分析其與OLP臨床特點之間的關係。（2）研究OLP中自噬相關蛋白和Akt/mTOR信號通路蛋白的變化規律及其臨床意義。（3）研究IGF1對T細胞自噬、增殖、凋亡、活化及炎性因子分泌的作用。（4）探究IGF1介導的PI3K/mTOR-自噬對T細胞生物學功能的影響。（5）構建T細胞-角質形成細胞共培養模型，研究IGF1和PI3K/mTOR通路在T細胞與角質形成細胞互動對話中的作用。 研究結果顯示（1）IGF1在OLP患者尤其是女性、中年患者（30-50歲）外周血T細胞中表達增高，而ATG9B在非糜爛型OLP患者中的表達減少。（2）自噬相關蛋白（IGF1、ATG9B、LC3B、ULK1）和Akt/mTOR信號通路相關蛋白（p-Akt、p-mTOR）在OLP組織和病損局部T細胞中表達上調。（3）IGF1能夠抑制T細胞自噬及增殖、促進T細胞凋亡、影響T細胞的活化及細胞因子分泌。（4）IGF1拮抗LY-294,002和Rapamycin對自噬的調控作用。Rapamycin激活自噬抑制T細胞增殖，促進T細胞凋亡和細胞活化，LY-294,002抑制自噬對T細胞增殖和活化的調控呈營養底物依賴性。IGF1介導的PI3K/mTOR對T細胞增殖和凋亡的調控作用呈時間依賴，並在一定程度上影響T細胞分泌細胞因子。（5）共培養體系中T細胞受IGF1和PI3K/mTOR干擾自噬後，促進角質形成細胞增殖，影響角質形成細胞凋亡和細胞因子分泌。 本研究提示OLP外周血和局部病損組織T細胞中存在自噬異常；自噬相關蛋白可在一定程度上評估OLP的疾病嚴重程度；IGF1及其參與的PI3K/mTOR通路調控的自噬異常在T細胞-T細胞、T細胞-角質形成細胞對話中發揮了一定的作用。因此IGF1可能通過調控T細胞自噬，從而在OLP炎症微環境中發揮免疫調節作用。本研究揭示了T細胞自噬在OLP免疫發病機制和診療新靶點中的重要理論意義和套用價值。