《STK33在頭頸腫瘤細胞增殖及信號轉導過程中的作用和機制》是依託山東大學，由李建峰擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：STK33在頭頸腫瘤細胞增殖及信號轉導過程中的作用和機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李建峰
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
最近發現一種新的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶STK33（serine/threonine kinase 33），與依賴於ras基因突變的腫瘤細胞的生物學特性密切相關，但目前對其功能知之甚少。我們在前期研究中發現，正常或腫瘤細胞STK33基因的表達受細胞密度的控制；且STK33 在喉癌、下咽癌等腫瘤手術切除標本中的表達量顯著高於正常或癌旁組織。那么STK33調控細胞增殖的機制如何？尚不清楚。本課題擬在前期研究的基礎上，進一步明確STK33在調控細胞增殖過程中的作用，鑑定STK33新的細胞信號轉導通路和與之相互作用的靶蛋白；探討STK33對正常細胞轉化和腫瘤細胞轉移的影響；及鈣離子/鈣調素對STK33的調節。為深入研究STK33與細胞增殖的關係提供實驗依據，進而為頭頸腫瘤的治療提供新的策略。
結題摘要
闡明STK33基因表達與細胞增殖的關係；探討STK33基因表達對細胞增殖調控的機制。探討STK33對正常細胞轉化及腫瘤細胞轉移的影響及鈣離子/鈣調素對STK33的調節。為深入研究STK33與細胞增殖的關係提供實驗依據，進而為頭頸腫瘤的治療提供新的策略。本課題通過對不同密度的Fadu細胞的RNA和蛋白的檢測，發現STK33隨著細胞接種密度的增加其mRNA及蛋白水平呈顯著性增高，與細胞密度呈顯著性正相關。進一步的研究表明RNA干擾介導的STK33的抑制會抑制細胞活性，誘導Fadu細胞凋亡，同時發現STK33的抑制與細胞外調節蛋白激酶1/2（ERK1/2）抑制劑PD98059有協同作用，凋亡與半胱氨酸基天冬氨酸特異性蛋白酶3（Caspase-3）的高表達以及B細胞淋巴瘤-2（Bcl-2）的低表達有關聯。細胞周期實驗表明STK33-RNAi阻礙G2/M期。至於STK33與增值的關係，STK33-RNAi和PD98059共同降低Ki-67的表達，這與FaDu細胞低的克隆形成能力有關。另外，侵襲和轉移實驗表明，STK33和ERK1/2協同地提高Fadu細胞的轉移和侵襲能力，且Nm-23低表達。此外，STK33-RNAi與PD98059一起通過提高上皮鈣粘蛋白（E-Cadherin）的表達以及降低波形蛋白的表達來抑制上皮間充質轉變。考慮到STK33可能是ERK1/2的下游，這些結果確定STK33作為一個重要的腫瘤促進劑可能參與ERK1/2通路來提高增殖，誘導侵襲和轉移，並且誘導Fadu細胞上皮間充質轉變，這表明STK33可能是人下咽癌的潛在靶向治療。研究表明，鈣離子通道活化劑Ionomycin作用Fadu細胞後，細胞內鈣離子濃度明顯增加；隨著時間的增加，細胞存活率下降；STK33的mRNA和蛋白水平表達增高，在2-4小時達到高峰；而在使用RNA干擾抑制STK33表達的細胞中，Ionomycin作用後細胞存活率下降顯著低於未乾擾的細胞。鈣離子濃度的提高會在一定程度一定時間內提高STK33的表達，STK33的干擾抑制會保護細胞免受高濃度鈣離子的損傷總之，本課題的研究為深入研究STK33與細胞增殖的關係提供實驗依據，進而為頭頸腫瘤的治療提供新的策略。
