《SIRT1調控的內皮祖細胞在血管新生軸中的調控作用及機制》是依託上海交通大學，由姜萌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：SIRT1調控的內皮祖細胞在血管新生軸中的調控作用及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：姜萌
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
內皮祖細胞（EPC）雖然能夠定向參與急性心梗後缺血部位的血管新生，但可供移植的EPC數目不足、移植後EPC易在缺血環境中受損，影響著EPC作為種子細胞的廣泛套用。SIRT1是NAD+依賴性III類去乙醯化酶，在抵禦應激、代謝、細胞存活及微調血管分化中扮演著關鍵角色。本研究組在EPC的前期實驗中證實：急性缺血後移植EPC，確可促進缺血部位缺血損傷的修復；低氧環境對EPC的促血管新生起了重要作用；同時，急性心梗後SIRT1蛋白高表達，並可在低氧中脫乙醯化低氧誘導因子1（HIF-1）。本項目擬用一個靶點，即SIRT1，在體內、外實驗對EPC進行干預，觀察其對EPC未分化狀態、成血管狀態、對血管或心肌的保護,目的是在體外獲得更多的EPC，更好的發揮其在體內的成血管作用；同時闡明SIRT1在維持EPC未分化狀態、低氧等不同階段的作用機制，為SIRT1干預EPC提供理論依據。
結題摘要
本研究主要目的是提供一種可供移植的幹細胞，作為種子細胞促進血管新生。擬主要在內皮祖細胞（endothelial progenitor cells, EPC）上完成，並研究SIRT1在EPC的表達。目前基本完成主要研究內容，在原有的內皮祖細胞分離基礎上進行了改良，建立了一套完整的內皮祖細胞分離、培養的體系，使細胞能夠更好的貼壁，收穫更多的細胞，採用單個核細胞體外誘導及流式分選方法為本課題提供了良好的細胞培養平台。觀察了臍血來源的CD34+細胞在不同生長因子的作用下的細胞增殖情況，發現SR1 + cytokine mix (SCF + TPO + Flt-3 L)可以進一步增加細胞數目；測定了SIRT1在EPC上的表達，對CD34+細胞而言，白藜蘆醇對SirT1和HIF-1的表達影響很小；在1%氧環境中培養4h、6h、12h、24h，用Western blot 方法檢測SirT1、HIF-1和HIF-2蛋白表達；所促進的血管分化方向研究提示，CD34+細胞爬片後出現分化，細胞同時表達EprinB2和EphB4，提示動、靜脈血管成分均出現。本研究的另一個重要發現是，在EPC培養同時，也進行了EPC與間充質幹細胞（mesenchymal stromal cells, MSC）培養上的對比，EPC整體上生長不如MSC迅速、數目不如MSC充足，因此後期的研究工作則放在了對MSC性質的鑑定、在促血管新生功效上的評價。目前正在進行的是評估在體的MSC促血管新生療效， 建立了螢光染料羅丹明123在MSC活細胞線粒體的染色。成功建立了兔的心肌梗死模型，確定了細胞移植時間及劑量，重複測定心功能的三維心肌運動追蹤方法，為本課題的動物模型實驗打下基礎。
