《ALDH2-SIRT1軸對內皮衰老及動脈粥樣硬化的調控作用》是依託山東大學，由薛麗擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ALDH2-SIRT1軸對內皮衰老及動脈粥樣硬化的調控作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：薛麗
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
內皮衰老可引起內皮功能障礙，是動脈粥樣硬化（AS）形成的關鍵始動環節。本項目在我們前期工作觀察到乙醛脫氫酶2（ALDH2）可抵抗內皮衰老和AS發生的基礎上，擬在AS小鼠模型及衰老內皮細胞上，觀察內源性ALDH2的表達及活性變化；以細胞衰老表型轉變和內皮功能指標的變化為主要指標，觀察調控ALDH2活性對內皮衰老及AS發生的影響；利用基因過表達、RNA干擾等分子和細胞生物學技術，觀察ALDH2對抗衰老因子SIRT1蛋白表達及活性的影響，以論證ALDH2是機體重要的內源性抗衰老防禦因子的假說；通過免疫共沉澱和高效液相色譜和串聯質譜等技術，探討ALDH2對SIRT1作用的深層分子機制是否與NAD+/NADH比值、4-HNE化學修飾、SIRT1核漿穿梭等因素相關，以期探尋AS發病的新機制和防治的新策略。
結題摘要
內皮衰老可引起內皮功能障礙，是動脈粥樣硬化（AS）形成的關鍵始動環節。在本研究中主要在AS小鼠模型及衰老內皮細胞上，觀察內源性ALDH2的表達及活性變化；以細胞衰老表型轉變和內皮功能指標的變化為主要指標，觀察調控ALDH2活性對內皮衰老及AS發生的影響；利用基因過表達、RNA干擾等分子和細胞生物學技術，觀察調控ALDH2活性對抗衰老因子SIRT1蛋白表達及活性的影響；通過免疫共沉澱技術，探討ALDH2對SIRT1作用的深層分子機制。研究結果表明： （1）利用乙醇增強ALDH2活性後，可延緩內皮細胞複製性衰老及改善內皮功能。① 乙醇增強ALDH2活性，可抑制內皮細胞複製性衰老及增強eNOS表達和活性；② 激活ALDH2可通過抑制SIRT1核漿穿梭、抑制p53乙醯化修飾發揮抗內皮細胞衰老作用；③ 激活ALDH2可通過抑制4-HNE積聚，進而阻斷4-HNE與SIRT1結合，發揮抑制SIRT1核漿穿梭的作用；④ 激活ALDH2減少SASP中炎症因子的釋放，抑制炎症反應。 （2）利用乙醇刺激建立激活ALDH2的小鼠模型採用不同乙醇劑量（0.03、0.3、3 g/kg）干預高脂餵養的apoE-/-小鼠，根據對各組斑塊發展、內皮衰老的各項指標和上述實驗中確定的蛋白分子進行檢測和統計，結果發現，0.3g/kg乙醇可增強血管ALDH2表達及活性，並抑制內皮衰老表型、拮抗AS的發生。 （3）激活ALDH2在抗AS發生髮展中的作用在上述工作基礎上，建立ApoE-/-小鼠AS形成模型，並採用乙醇和/或ALDH2干擾病毒調控ALDH2活性，檢測對斑塊發展、內皮衰老指標的影響，結果表明，ALDH2激活後可延緩內皮衰老、抗AS發生，其機制與抑制SIRT1依賴的p53乙醯化修飾有關。進一步在體內實驗中驗證ALDH2是乙醇延緩內皮衰老、抗AS發生髮展機制中的重要靶蛋白。該課題結果證實ALDH2是機體重要的內源性抗衰老防禦因子，並通過抑制SIRT1核漿穿梭，進而增加p53脫乙醯化發揮抗內皮衰老的保護作用，為動脈粥樣硬化防治策略提供新的靶點，具有重要臨床意義。
