《NKT樣細胞亞群抗腫瘤作用及其機制研究》是依託清華大學，由張明徽擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：NKT樣細胞亞群抗腫瘤作用及其機制研究
- 依託單位：清華大學
- 項目負責人：張明徽
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
NKT細胞是表達NK細胞標誌的一類特殊T細胞群，在抗腫瘤、自身免疫病的發生中具有重要作用。目前已證實Ⅰ型NKT在體內外具有確切的抗腫瘤作用，其特異性激活物α-Galcer可能成為新的抗腫瘤藥物。本課題組發現NKT中的MHC-I限制性NKT樣細胞亞群具有更顯著的抗腫瘤活性，並創立了NKT樣細胞的體外擴增方法。NKT樣細胞表達αβTCR,CD3,NK1.1,DX5,CD8，不與CD1d四聚體結合，胞漿內含有豐富的功能性顆粒，對多種腫瘤細胞有直接殺傷作用，並具有NK細胞的非特異性和CTL的抗原特異性雙重殺傷活性，目前國際上尚未有類似的報導。體內抗腫瘤實驗發現，NKT樣細胞過繼回輸治療能有效抑制小鼠黑色素瘤高轉移株B16-F10肺轉移灶的形成。本項目擬對NKT樣細胞的非特異性和特異性雙重抗腫瘤效應機制進行深入探討，以期為研究人的NKT樣細胞的生物學特性及抗腫瘤免疫治療奠定研究基礎。
結題摘要
NKT細胞同時表達TCR和NK標誌，是一群重要的免疫細胞，研究發現其在抗感染、抗腫瘤和自身免疫病的發生中具有重要的作用。受MHC-I限制，帶有NK標誌和廣譜TCR的NKT亞群（NKT樣細胞），占總NKT細胞的40%，由於缺乏有效的細胞擴增手段，至今仍是免疫學領域和腫瘤學研究領域的空白點。本項目通過在體外添加抗原，成功擴增出CD8dim NKT細胞，其TCR譜具有多樣性，屬於NKT樣細胞。研究發現CD8dim NKT細胞能夠在體外殺傷多種腫瘤細胞，具有非抗原特異性抗腫瘤效應。進一步研究表明， CD8dim NKT細胞具有NK細胞類似的抗腫瘤相關顆粒釋放途徑，並且釋放的顆粒能在體外殺傷腫瘤細胞，提示此為其非特異性抗腫瘤效應的機制。通過在以上NKT細胞培養體系中加入特異性的內源性抗原，成功擴增出CD8+NKT細胞。通過體外和體內過繼回輸實驗證明，該群細胞具有抗原特異性和非特異性抗腫瘤能力。通過活細胞工作站觀察，發現CD8+NKT細胞對B16-GFP細胞的殺傷能力顯著強於NK細胞和CTL細胞。通過表達分析和基因晶片手段檢測，發現相比NK、CTL細胞，CD8+NKT細胞高表達顆粒釋放相關分子，其中尤以Granzyme B的高表達最為顯著。進一步通過對NKT細胞的Granzyme B分子和B16細胞進行不同的螢光標記後，利用共聚焦顯微鏡觀察CD8+NKT細胞殺傷腫瘤細胞的過程，發現CD8+NKT殺傷腫瘤細胞的效應依賴於穿孔素-顆粒酶途徑。通過將MDSCs與OVA特異性的CD8+NKT樣細胞或CTLs共培養，流式細胞儀分析計數MDSCs細胞存活率，表明CD8+NKT樣細胞能比CTLs更有效地殺傷MDSCs，並且其殺傷效應具有抗原特異性。
