《非CD1d限制性NKT亞群的抗原特異性負向調節作用研究》是依託清華大學，由張明徽擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：非CD1d限制性NKT亞群的抗原特異性負向調節作用研究
- 依託單位：清華大學
- 項目負責人：張明徽
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
NKT細胞(同時表達TCR和NK標誌的細胞群)是一群重要的免疫細胞，研究發現其具有明顯的抑制自身免疫病、抗感染和抗腫瘤效應。NKT細胞在體內含量甚微，亞民眾多，由於缺乏有效的體外擴增方法，目前NKT功能研究尚不深入。本課題組通過表達特定抗原的樹突狀細胞免疫小鼠後，分離脾臟NKT細胞並進行體外抗原誘導，能大量擴增一群具有抗原特異性的NKT。該群體表達NK1.1,DX5,TCR(alpha/betta)和低豐度CD8,不表達CD4，不與CD1d-alpha-GalCer Tetramer反應，胞內含有豐富的功能性顆粒，初步確定為非CD1d限制性CD8陽性NKT亞群，並具有明顯的NK細胞活性和抗原特異性CTL活性。功能測試表明該細胞能強烈抑制抗原特異性CD4的活化和增殖，並顯示具有MHC-I抗原特異性和依賴性。本研究擬對該細胞的生物學特性進行深入研究並揭示其抗原特異性負向調節作用的機制。
結題摘要
作為一類兼具T細胞和NK細胞特徵的免疫細胞，NKT細胞在免疫調節和免疫穩態形成中發揮了重要作用。在以小鼠為動物模型的研究中，目前研究的重點多集中於對經典NKT細胞（表達Vα14Jα18類型TCR的NKT細胞，又名iNKT）的研究，而對具有多樣可變TCR的NKT細胞（以下簡稱為vNKT細胞）的功能尚不清楚。本實驗以GFP-DC和OVA-DC作為攜帶內源性抗原的DCs刺激正常小鼠的免疫系統，藉助T2小鼠CD4 T細胞和T1小鼠的CD8 T細胞對攜帶特異性抗原的DCs的免疫反應，通過對效應性T細胞增殖能力和細胞因子分泌的檢測，體現NKT細胞對免疫系統的抗原特異性調節作用。研究發現，免疫兩次後的正常小鼠脾臟細胞中，非CD1d限制性的NKT細胞數量顯著增多。對免疫後小鼠脾臟細胞內非CD1d限制性的NKT細胞依據CD8分子的表達強度進行分選，並與免疫的GFP-DC或OVA-DC共培養，發現CD8弱陽性NKT細胞（以下稱為CD8dim vNKT細胞）能夠經歷抗原特異性的活化和擴增。在體內和體外的抗原遞呈模型中，T2小鼠的CD4 T細胞和T1小鼠的CD8 T細胞被用作免疫應答強度的指示細胞，GFP-DC和OVA-DC被用作DCs，我們發現，當體系中加入與CD8dim vNKT細胞TCR識別的抗原相匹配的DCs時，T細胞的免疫反應受到了抑制。活細胞工作站觀察表明，這種抑制作用源於CD8dim vNKT細胞對攜帶其TCR識別的抗原的DCs的殺傷作用，且添加可被MHC-I類分子結合的無關對照肽後，這種殺傷作用無法體現。本研究揭示：攜帶內源性抗原的DCs能夠刺激一個NKT細胞亞群——CD8dim vNKT細胞的活化和增殖，後者能夠抗原特異性和MHC-I類分子限制性的殺傷DCs，並以此抑制CD4 T細胞和CD8 T細胞介導的免疫反應。
