DNA甲基化、去甲基化過程的電化學研究

《DNA甲基化、去甲基化過程的電化學研究》是依託南京師範大學，由張卉擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：DNA甲基化、去甲基化過程的電化學研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張卉
• 依託單位：南京師範大學

項目摘要

DNA甲基化、去甲基化在許多基本的生物過程，如轉錄調控、幹細胞多能性、及癌症中扮演著重要的角色。本項目提出利用電化學方法研究DNA甲基化、去甲基化過程。以人類結腸癌DNA為研究對象，利用電化學方法結合原位光譜學技術，建立對DNA甲基化、去甲基化過程中產生的不同鹼基，如胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、5-羥甲基胞嘧啶、5-羧基胞嘧啶的電化學檢測方法。在此基礎上，監測甲基化、去甲基化的過程，研究蛋白質（酶）的催化活性及不同機制下的動力學特徵，考察各種因素如pH值、溫度、蛋白質（酶）等對於其過程的影響。本項目的研究結果不僅對開發靈敏度高、穩定性好的DNA生物感測器具有重要的指導意義，並且有助於更深入地了解DNA甲基化、去甲基化的過程，從分子水平上解釋某些疾病的致病機制，為疾病的診斷與治療提供重要的理論指導。

結題摘要

DNA甲基化、去甲基化在許多基本的生物過程，如轉錄調控、幹細胞多能性及癌症中扮演著重要的角色。本課題利用電化學、電致化學發光、螢光方法結合信號放大實現了對DNA甲基化水平、DNA甲基化轉移酶（M.SssI以及DNMT1）活性的高靈敏檢測，研究了幾種抗癌藥物對甲基轉移酶活性的抑制作用，並對不同癌細胞內DNMT1的活性進行了檢測和比較，其結果與商品化試劑盒測試結果保持一致。利用電化學、螢光方法研究了DNA去甲基化水平和DNA去甲基化酶活性。利用電化學方法結合DNA雜交鏈反應實現了對含有5-甲基胞嘧啶、5-羥甲基胞嘧啶的DNA的同時電化學檢測。利用電致化學發光方法實現了對Hsp53 腫瘤抑制基因的甲基化水平和位置的有效檢測。針對近幾年的DNA甲基化分析的文章進行了總結，歸納，整理了一篇綜述文章。其研究結果不僅有助於DNA甲基化、去甲基化的研究，而且為分析腫瘤細胞提供了有用的平台。其在DNA甲基化相關的臨床診斷中具有很大的套用潛力，對發現新的抗癌藥物方面具有潛在的套用價值。