《DNA甲基化的電化學檢測和特異位點預測研究》是依託中山大學，由鄒小勇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：DNA甲基化的電化學檢測和特異位點預測研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄒小勇
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本項目以DNA甲基化的電化學檢測及特異位點預測為研究目的。建立DNA甲基化/去甲基化的表觀遺傳學模型，包括：基因啟動子區域DNA片段的構建，以及DNA片段的CpG酶促甲基化等。建立DNA甲基化/去甲基化的電化學檢測方法，包括：基因組DNA整體甲基化水平的檢測，特異性位點甲基化狀態的電化學識別，腫瘤抑制基因甲基化突變的電化學控制及其在腫瘤生長過程中的作用，以及DNA多位點甲基化水平的電化學陣列晶片的研製。研究改進型支持向量機及聯用技術預測DNA新甲基化位點方法。以已知基因INK4A (p16) 啟動子區域CpG島為研究對象，考察並完善建立的方法。對未知的甲基化狀態進行預測和檢測，與甲基化特異性PCR（MSP）或定量MSP進行對照。跟蹤DNA甲基化/去甲基化的變化過程，為藥物快速篩選及臨床套用提供依據。本課題的研究必將豐富臨床檢驗新技術，在表觀遺傳學和臨床醫學等方面具有重要理論意義和實用價值。
結題摘要
本課題以DNA 甲基化的電化學檢測及模式預測為研究目的，取得以下主要研究成果：建立了一種免標記識別p53腫瘤抑制基因甲基化狀態的方法，該方法無需PCR擴增、限制性內切酶的切割以及放射性標記，具有快速方便的特點。建立了基於連線酶的p53腫瘤抑制基因多特異甲基化位點的電化學檢測，可方便實現對p53腫瘤抑制基因多特異甲基化位點的高靈敏檢測，無需PCR和限制性內切酶。建立DNA 特異位點甲基化的免標記電化學檢測方法，該方法可對待測 DNA 中特異位點的甲基化水平進行靈敏檢測，無需 PCR 擴增和亞硫酸鹽處理等，為 DNA 特異位點甲基化的電化學檢測提供新方法。建立了一種基於嘌呤和嘧啶鹼基化學計量關係的DNA甲基化電化學檢測方法，該方法已成功套用於實際樣品中DNA甲基化程度的檢測，結果令人滿意。建立了人類DNA序列甲基化位點及其甲基化程度的預測方法，所建立的方法能實現對DNA甲基化的有效預測。已發表學術論文20篇，申請國家發明專利6件。本課題的研究必將豐富臨床檢驗新技術，在表觀遺傳學和臨床醫學等方面具有重要理論意義和實用價值。
