《DNA甲基化的電化學檢測及其醫學套用》是依託中山大學，由戴宗擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：DNA甲基化的電化學檢測及其醫學套用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：戴宗
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本項目以 DNA 甲基化的電化學檢測為研究目的。建立 DNA 甲基化電化學檢測方法，包括：DNA 整體甲基化水平檢測，特異位點甲基化狀態電化學識別，以及多位點甲基化水平同時檢測的電化學陣列晶片。建立動態檢測 DNA 甲基化/去甲基化過程的方法。包括：研究 DNA 甲基化/去甲基化過程的控制方法，套用表面電漿共振（SPR）和流動注射（FIA）等技術動態檢測 DNA 甲基化/去甲基化過程。以已知基因 INK4A(p16) 啟動子區域 CpG 島為研究對象，定量描述腫瘤抑制基因甲基化/去甲基化的變化過程，研究活性分子（包括藥物分子、小 RNA 分子和蛋白質分子等）對腫瘤抑制基因甲基化/去甲基化過程的影響，探索腫瘤抑制基因甲基化突變的電化學控制及其在腫瘤生長過程中的作用，為藥物快速篩選及臨床套用提供依據。本課題的研究必將豐富臨床檢驗新技術，在臨床醫學和新藥開發等方面具有重要理論意義和實用價值。
結題摘要
本課題以建立DNA甲基化的電化學檢測方法為目的，取得以下幾方面研究成果：（1）DNA整體甲基化檢測研究：利用納米材料的電催化性質，結合鹼基互補配對原則，建立了免標記、免PCR擴增的方法，套用於p53腫瘤抑制基因中158號密碼子整體甲基化檢測；（2）DNA特異位點甲基化檢測研究：利用限制性內切酶、DNA連線酶、化學氧化斷鏈、以及分子信標的高效選擇性，結合恆溫指數擴增、量子點標記等信號放大策略，發展了系列DNA特異位點甲基化和多特異位點甲基化同時檢測方法，實現對p53腫瘤抑制基因特異甲基化位點的快速、高靈敏檢測；（3）新表觀遺傳修飾方式檢測研究：套用核酸toehold交換原理，建立DNA羥甲基化（5-hmC）、甲醯化（5-fC）和羧甲基化（5-caC）同時檢測技術；（4）甲基化/去甲基化過程酶活性動態檢測研究：基於DNA長程電子轉移原理，套用氧敏感MOF材料發展了甲基化轉移酶（DNMT），TET蛋白活性實時檢測技術；（5）與甲基化修飾過程調控相關的生物分子檢測研究及生物信息學研究。研究工作發表SCI論文15篇，其中IF＞5.0論文10篇，包括Trends in Anal. Chem. 1篇，Anal. Chem. 3篇，Chem. Commun. 3篇，Biosens. Bioelectron. 3篇，申請發明專利3件。本課題的研究必將豐富臨床檢驗新技術，在臨床醫學和新藥開發等方面具有重要理論意義和實用價值。
