《DNA甲基化電致化學發光生物感測器的研究》是依託西北大學,由李延擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:DNA甲基化電致化學發光生物感測器的研究
- 項目類別:青年科學基金項目
- 項目負責人:李延
- 依託單位:西北大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本項目擬開展DNA甲基化電致化學發光生物感測器的的研究。以腫瘤相關的基因組甲基化DNA序列為目標物,針對CpG島由於富CG區域而難以進行聚合酶序列放大的問題,利用亞硫酸氫鈉的選擇性轉化反應,將DNA甲基化檢測問題轉化為單核苷酸二態性分析問題,以連線酶分子識別為基礎,探索建立高特異性DNA甲基化分析的新方法;以甲基化DNA結合蛋白分子識別為基礎,發展甲基化DNA序列選擇性降解或保護分析的新方法。在此基礎上,結合納米放大、核酸信號放大和電致化學發光等技術,發展快速、高靈敏度、高特異性DNA甲基化檢測的電致化學發光感測新器件和新方法。該研究豐富了電致化學發光生物感測器的內容,為CpG島的甲基化分析、腫瘤臨床早期診斷與發病機制以及表觀遺傳學的研究等生命科學中的重大研究提供新的方法和技術。
結題摘要
本項目開展DNA甲基化電致化學發光生物感測器的研究。以核酸修飾酶與甲基化DNA結合蛋白對非甲基化或甲基化胞嘧啶相關序列的選擇性修飾反應為分子識別依據,結合納米放大、核酸信號放大和電致化學發光等技術,發展快速、高靈敏度、高特異性DNA甲基化檢測的電致化學發光感測新器件和新方法,為CpG島的甲基化分析提供新的方法與技術。 (1)利用納米材料如金納米、碳納米管、石墨烯和離子液體-碳納米管等為電極新材料製作納米組裝功能化固定界面。研究了甲基化DNA序列與電致化學發光信號物質Ru(bpy)32+衍生物、具有電致化學發光性能的納米材料等的標記方法。(2) 以納米材料作為電極修飾材料,研製了以適配體、富T鹼基DNA序列為分子識別物質的三種電化學生物感測器,建立了三種高靈敏度檢測凝血酶、Pb2+和Hg2+分析新方法;基於特異性發卡DNA對博來黴素及其Fe2+配合物的識別作用,建立兩種超高靈敏度和高選擇性測定抗腫瘤藥物博萊黴素的電致化學發光感測新方法。(3) 以DNA甲基化轉移酶和限制性內切酶組合分子識別為基礎,建立了五種高靈敏度高特異性的DNA甲基化電致化學發光生物感測新器件和新方法。這些研究成果揭示了生物感測信號傳導、識別反應和回響模式對感測器靈敏度和選擇性影響的一些規律。發表論文5篇,其中SCI源刊論文4篇(影響因子大於5.0刊物3篇),培養碩士研究生6名。